人丁型肝炎病毒IgM(HDV-IgM)ELISA试剂盒 返回列表页

一.   实验原理：试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUT OFF值相比较，从而判定标本中人丁型肝炎病毒IgM（HDV-IgM）的存在与否。

二.  人丁型肝炎病毒IgM(HDV-IgM)ELISA试剂盒组成及其配置：

三.   常见问题解答：

1.     【高背景或阴性对照值偏高】

可能的原因：阴性对照孔被阳性对照或样品污染；抗体非特异性结合；酶结合物过浓；孵育温度过高；底物在使用前曝光；读板前停留时间过长

上海轩泽康生物为您提供解决方案：洗涤时勿将洗液溢出孔外；建议更换封闭液；检查酶结合物是否按照说明书规定稀释；检查孵育箱的温度是否正确、稳定；应保存在暗处、避光；加终止液后3分钟内读数。

2.     【阳性对照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 试剂未平衡至室温;检测体积偏小;孵育时间过短;底物受污染;样本中有抑制剂。

上海轩泽康生物为您提供解决方案：实验开始前，将试剂盒从冰箱内取出平衡至室温（20-25℃）；检查移液器吸液通道是否堵塞；使用计时器，准确孵育时间；使用新配置的试剂，重新实验；叠氮钠会抑制HRP酶的活性。

四. 人丁型肝炎病毒IgM(HDV-IgM)ELISA试剂盒操作注意事项：

1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.  预处理后的样本无需稀释，直接取50μL加样即可。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。