轩泽康生物植物(COX)ELISA活性检测试剂盒 返回列表页

轩泽康生物植物(COX)ELISA活性检测试剂盒检测前准备工作：

1.      请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2.      从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃

3.      20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被（COX）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的（COX）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法：轩泽康生物植物(COX)ELISA活性检测试剂盒

1.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

2.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

3.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

（细胞处理方案）

）贴壁细胞需要先用yi酶消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集） ；

2）将收集到的细胞用冷PBS 洗3次；

3）物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融） ：

⇒ 超声破碎：取适量PBS 重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂；

⇒ 反复冻融：将待破碎的细胞在-20 度以下冰冻，室温融解，反复3次，使细胞溶胀破碎；

4）将标本于2-8 度 1500×g 离心 10 分钟，收集上清备用。

试剂盒性能：

1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2.  灵敏度：zui低检测浓度小于0.1 U/L。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。