4XSDS分离胶缓冲液（pH8.8)

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产品说明：

本试剂为配制SDS-PAGE分离胶缓冲液，可用于配制各种浓度的变性PAGE凝胶，方便、快捷。产品中已加入10%SDS，使用时不用另外加入。

操作步骤(仅供参考)：

根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考附表。

灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表)

1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。  

2、将不同体积的30%丙烯酰胺/甲叉29:1 、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。

3、加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端 1.5 cm或距梳齿约0.5cm即可)。

5、静置，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。

灌制浓缩胶

1、小心倾倒出覆盖在分离胶上的水层。  

2、将不同体积的30%丙烯酰胺/甲叉29:1 、分离胶缓冲液和蒸馏水在一个小烧杯或试管中混  合。  

3、加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

5、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。

6、静置，等待浓缩胶聚合。  

7、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。

进行常规电泳操作。

注意：

TEMED和10%过硫酸铵溶液最后加，在加入之前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在4度有限期为一周，TEMED容易挥发，使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固，如温度过低，可放37度温箱凝固。灌完分离胶后，轻轻的加1ml ddH2O封上层，凝固后可见到分界线。灌浓缩胶时先倾去水层。灌浓缩胶后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后，放入电泳液中（让电泳液漫过加样孔），轻轻拔出梳子。

附表：

根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶.

关于SDS-PAGE胶的配制，请参考

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