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葡萄糖-6-磷酸酶（G6P)测试盒

分光光度法50管/24样

注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

6PG (Glucose-6-phosphate，葡萄糖-6-磷酸，又称6-磷酸葡萄糖)，是糖酵解和磷酸戊糖途径的中间产物，广泛存在于动植物体和微生物中。在糖酵解的第一步反应中，葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸，然后通过磷酸葡萄糖异构酶的催化形成果糖-6-磷酸，以继续糖酵解的其它步骤；而在戊糖磷酸途径中，葡萄糖-6-磷酸是其第一个底物，该过程也是生成NADPH的主要途径。此外，葡萄糖-6-磷酸也能转化形成糖原或淀粉而被储存起来。

测定原理：

6-磷酸葡萄糖脱氢酶可催化6PG和NADP⁺生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色，在450 nm下测定吸光值。

需自备的仪器和用品：

分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体60 mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体30mL×1瓶， 4℃保存；

试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；

试剂三：液体3mL×1瓶， 4℃避光保存。

6PG提取：

1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆，8000g，25℃离心10min，取上清待测。

3、血清（浆）等液体样品：直接测定。

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