沙门氏菌荧光定量PCR检测试剂盒 返回列表页

沙门氏菌荧光定量PCR检测试剂盒

具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
2. 荧光定量 PCR 检测，反应特异性强。
3. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
规格及成分 成分 编号 50 次塑料袋包装
2×qPCR Mix 90408 1.0 mL
stn 专一性引物对 yw13891390 200 μL
stn 阳性对照，
XXX 10E9 拷贝/μL
yw13911392 100 μL
超纯水 100935 1 mL
使用手册 1 份

运输及保存 低温运输，-20℃保存，保存期限一年。
自备试剂 样品等
使用方法 一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取细菌样品 DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的
关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检
测灵敏度。

二、制备 stn 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓
度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本
试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供
活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳
性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到
10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7
拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震
荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5
拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6
个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个
样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，
并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。

三、数据处理

 以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品

的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值，再推算出其浓度。

沙门氏菌荧光定量PCR检测试剂盒相关产品：