SHP-77 人小细胞肺癌细胞（STR鉴定）

简介：

SHP-77 保留了SCLC的重要特征，具有稳定的生物化学特性，可以连续培养。该细胞系是小细胞肺癌中一种不常见的未分化大细胞突变体。它虽然具有突变体的形态，但保持了经典SCLC的生化特性。电子显微镜观察发现存在腺体形成和胞浆内板层体(intracytoplasmic lamellar bodies)。这些细胞表达神经内分泌标记物L-多巴脱羧酶和致密核心分泌颗粒(dense core secretory granules)。

SHP-77可用做检测51Cr和111In释放对体外细胞及裸鼠体内毒性的靶标，用于评估肺癌患者的细胞和血清的免疫反应水平。该细胞可用于评估接受放射或化学疗法治疗的SCLC患者的免疫状况。经本库STR检测无误。

细胞特性：

1） 来源：54岁 男性 肺; 小细胞肺癌

2） 形态：悬浮和松散贴壁

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

运输和保存：

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的注意事项：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完培6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完培来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。

培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640培养基                87%

优质胎牛血清                                 10%

GlutaMAX-1谷氨/酰胺                              1%

Sodium Pyruvate丙酮酸钠                       1%

P/S青霉/素-链霉/素                            1%
注意: 该细胞参考传代周期：4-6天,参考换液频率：每2-3天换1次液,传代时可以轻轻拍打细胞培养瓶侧面十余次，将悬浮的细胞进行收集离心，以40万~50万/ mL的密度重悬传代。轻轻拍打后显微镜下观察仍贴壁未悬浮的细胞量多的话可以继续拍打重复收集，细胞量很少的则丢弃，不收集传代。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完培的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完培重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完培的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

SHP-77 人小细胞肺癌细胞（STR鉴定）

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