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当前位置:世联博研(北京)科技有限公司>>单细胞单分子液滴包裹生成仪>>单层双层液滴包裹生成仪>> DNAdrop乳液PCR扩增制备系统
产地类别 | 进口 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,生物产业,建材/家具 |
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乳液PCR扩增制备系统 高通量单细胞单分子液滴分选与封装系统 可实现DNA或细胞封装和高吞吐量分选。 这使得能够以特别快的速度筛选大型复杂的基因库。 |
该系统是一种多功能和用户友好型皮升级液滴发生器,触摸屏化操作,*自动化液滴生成。用于准备DNA,细胞和其他生物材料样品,然后用于下游的高分辨率分析。 可以安全、快速地将单个分子、DNA文字片段、单个细胞或单个细胞器与生化反应试剂一起封装在高度稳定的双乳状或单乳状液滴中。这些液滴能在PCR、涡旋、孵育和长期储存过程中保持稳定。
封装液体药物的系统
采用*专有微流体技术,跨越基因和细胞研究的下一个前沿。它的*设计能帮助研究人员对人类、
动物、植物和微生物的细胞和基因组获得高分辨率的信息。
可以在用户友好型的工作流程中生成和分类双乳液滴,不需要任何使用过荧光细胞分类器的经验。
工作流程从将100 kb的DNA的文字片段、小单细胞或其他生物材料捕捉在高度稳定的液滴中开始,以用于诸如PCR和酶活性评价等测试当中。
然后,根据内含物的荧光对液滴进行分类,分离得到只含有感兴趣内容物的液滴,用于下游高分辨率分析,如:
●识别重排,如融合和倒置。
●*。
●识别病毒和转基因整合位点。
●在单细胞水平评估酶活性。
●进行高通量GFP筛选。绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一种常用
的报告基因这些数以百万计的液滴分别封装分子,细胞器,或小细胞(高达6µm直径)。每一个液滴都相当于一个反应室在其内进行单个分子或单个细胞分辨率水平的分析。
液滴是什么样子
基于微流体,在一个简单的工作过程中将数百万个分子分成液滴,从而能够高质量地靶向富集大片段(3E100 kb),
d用于后续测序 ,允许从几毫微克的脱氧核糖核酸开始靶向富集长脱氧核糖核酸分子。该系统是基于分离数百万个液滴中的长DNA文字片
段,其中含有感兴趣目标序列的液滴被荧光标记,并使用流式细胞术进行分类。该系统程序的终产品是可以通过测序研究的长脱氧核糖核酸分子的富集群体。是研究复杂基因组区域的有效富集技术。
为什么要选择该系统:
它提供了从大基因文库中准备基因材料的手段以用于高分辨率的筛查分析。
帮助回答一系列的基因组学和分子生物学问题。
支持合成生物学的工作流程,如酶进化及其路径工程。
具有用户友好型接口,具有将微液体技术接入各实验室的能力
乳液PCR扩增制备系统 阶段划分液滴系统
与适当的液滴分离、测序和分析技术相结合,该系统可应用于以下等几个方面:
●长或短读测序
●基因编辑分析
●无偏全基因组扩增
●酶活性评价
实现单分子或单细胞分辨率
提高基因组学和宏基因组学研究的分辨率。使用我们系统以及测序建议和生物信息学工具来执行一系列基因组学工作流程该系统在人类、其他动物、植物和微生物DNA的长读和短读测序工作流程中证明了其性能。
克服对植物庞大而复杂的基因组进行测序的挑战。该系统在支持各种植物基因组学工作方面表现出色,包括:
特征不明显的基因簇分析
由于参考基因组和植物品种之间的低对应性导致的间隙闭合
植物基因组结构重排的解析
生物合成基因簇的检查
使用该系统封装单个小细胞,包括微生物和藻类,以及生物活性分子。我们高度稳定的双乳化液滴提供了一种方法,可以孵育单个活细胞进行分析,并对它们进行分类,以在基于细胞的工作流程中获得高分辨率。Xdrop在封装细胞核方面也有良好的表现,其他细胞器的工作流程正在测试中。
新应用
定向进化作为蛋白质工程领域的重要方法,通过构建随机突变库,并用具有针对性的筛选方式对突变体的性质进行评估和分选,从而实现酶功能在分子水平上的改造。目前限制定向进化成功的关键仍是缺少真正高通量、通用型的高效筛选方法。
互不相溶的两相液体(轻石蜡油和水)在膜挤出仪内反复挤压通过聚碳酸酯滤膜,实现乳化过程并得到微液滴。具体研究包括:(1)乳化次数的优化。确定了一级乳化次数为15.5-20.5次,二级乳化次数为25.5-30.5次,同步提高了单层和双层微液滴的均一性。与常用的匀浆仪乳化法比较,膜挤出仪法保持了操作简便、液滴生成迅速的特点,而且在微液滴的均一程度上有着显著优势。验证了膜挤出仪法生成的微液滴中包裹单细胞的效率符合泊松分布;(2)酶反应的表征。确定了在皮升(10-12L)级别的微液滴中能够进行酶反应,且荧光信号稳定。筛选系统能够分辨不同底物浓度、不同酶浓度和不同酶活力形成的荧光信号差异,证明了此系统用于筛选的可行性;(3)酯酶活力的模式筛选实验。以表面展示酯酶AFEST的大肠杆菌细胞作为阳性个体,含有空质粒pGF101的大肠杆菌作为阴性对照,证明可在含大量阴性对照的群体中对少量有活性的阳性个体(如1/1000)进行富集,单次分选高富集效率达到333倍以上,显示了该体系较高的筛选效率。经过优化和表征,“膜挤出仪法-FADS"体系的效率和稳定性得到了显著提升,拥有进行实际突变库筛选的巨大潜力。
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