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应用领域 | 医疗卫生,环保,生物产业 |
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FAS-Digi 紧凑型凝胶成像系统
FAS-Digi 紧凑型凝胶成像系统 紧凑型凝胶成像系统
想象一下从 DNA 和 RNA 凝胶中获得精细的细节
FAS-Digi 紧凑型凝胶成像系统专为需要强大的凝胶记录系统但工作台空
间有限的实验室而设计。该成像平台围绕FastGene Blue/Green LED Gel
TransIlluminator XL 构建,它利用超亮蓝/绿 LED 优越技术. 海蓝宝石色照明是激发常见荧光 DNA 染料(如 EtBr 和 Sybr Green)的*。与紫外线透射仪相比,您始终可以期待至少相同的结果,但不会有损坏 DNA 或伤害您的皮肤和眼睛的风险。这是因为来自这些 LED 的能量较低的光子与紫外线不同,不会使 DNA 交联,从而使蓝/绿 LED 能够提高您实验室的亚克隆效率。与纯蓝色 LED 成像器相比,该系统旨在产生更强的信号和更低的背景。根据设计,它从相对侧(双 LED 矩阵)照明,而不是像大多数其他凝胶照明器那样从下方直接照射光。FAS-Digi Compact 是为与溴化乙锭 (EtBr) 等红色染料或下一代非致癌染料一起使用而开发的,Midori Green系列安全染料。LED 比传统的紫外线灯泡更安全、更高效,使 FAS-Digi 紧凑型系统非常小巧且非常耐用。
安全照明与紫外线照明
紫外线:良好的信号,不健康的副作用
紫外光透射仪使用单一波长来显示 DNA。红色和绿色 DNA 染料,例如溴化乙锭或 Midori Green 染料在紫外光谱中具有良好的吸收性。这会产生具有足够强度的 DNA 条带,但是,紫外光对用户和样本 DNA 都是危险的。仅 30 秒的紫外线照射就会显着降低克隆效率,并对下游应用产生影响。出于这个原因,用紫外光观察 DNA 不是方法。
蓝/绿:对所有 DNA 染料进行安全和强大的检测
与紫外光相比,蓝/绿 LED 技术使用 470 nm 和 520 nm 之间的宽光谱。这种光对 DNA 或用户无害。即使是溴化乙锭或其他在该光谱区域具有低吸收的红色 DNA 染料,其 DNA 条带强度也可与紫外线照射相媲美。其原因是 DNA 在蓝/绿光谱中的累积能量吸收(曲线下面积)。绿色 DNA 染料在蓝/绿光谱中显示出非常高的吸收强度,导致 DNA 条带的强度更高。
升级您的相机
使用佳能 EOS 250D 拍摄高质量的琼脂糖凝胶图像。这台相机有一个巨大的 APS-C CMOS 传感器。该传感器从 ISO 100 一直到 ISO 1600 都不会产生任何可见的噪音。此外,它的 24 兆像素甚至可以检测到微弱的信号。传感器的曝光时间可以设置为 1/4000 秒到 30 秒。很短的曝光时间保证了即使是亮的 DNA 条带也能在动态范围内可见。将传感器暴露 30 秒将
能够检测到您的眼睛看不到的条带。3 倍光学变焦(焦距为 18 毫米至 55 毫米)提供
了对感兴趣区域的放大。
易于访问
FAS Digi 紧凑型系统具有内置的琥珀色过滤器观察窗,可让您观察发光的凝胶,并
解放双手,、轻松地切割凝胶带。如果与我们的Midori Green Stain一起使用,
您也无需担心诱变染料!快速、且*安全,这是处理 DNA 的佳方式。在常
规处理 DNA 以进行亚克隆、基因分析或其他应用时,根本没有理由让您或您的实验
室工作人员处于危险之中。
对您更安全,对您的亚克隆更好
通过使用安全的 MIDORI Green 染料和安全的蓝/绿 LED 照明,您可以将亚克
隆转化效率提高三倍. 在下面的示例中,质粒载体用合适的限制性内切酶双重消化,
产生两个粘性末端 DNA 片段:lacZ 基因 (3,536 bp) 和载体骨架 (4,318 bp)。在
1% 琼脂糖凝胶上对等量的消化 DNA 进行电泳。根据相应的手册,用溴化乙锭或
MIDORI Green Direct 凝胶染料对凝胶进行染色,然后分别使用 UV 透射仪或
FastGene 蓝/绿 LED 照明器进行观察。从凝胶上切下两个 DNA 片段并使用基于
硅胶膜的纯化试剂盒进行纯化。使用转化到 DH5a 细胞中的 T4 DNA 连接酶
将 lacZ 基因和载体骨架重新连接并铺板到选择板上。计数蓝色和白色菌落的总数
以评估克隆效率。每个实验一式三份进行,并确定平均克隆效率。MIDORI Green
Direct 导致阳性转化体的显着增加。
溴化乙锭通常与强紫外光源结合使用,以在连接反应之前切除 DNA 条带以进行纯
化。大家都知道的,短波长光会导致胸腺嘧啶二聚体并破坏 DNA。这种损害的程度并不
总是受到重视。高能光在几秒钟内就对 DNA 片段造成严重破坏。如下所示,在标准
琼脂糖凝胶中仅暴露 15 秒 DNA 后,克隆效率开始下降。曝光 30 秒后,你的克隆实验几乎死了!相比之下,使用蓝色 LED 或 Nippon Genetics 的超高性能蓝色/绿色 LED 的方案的克隆效率*不受这种有害影响的影响。如果您的实验室无法摆脱溴化乙锭的习惯,请使用蓝/绿 LED 照明器(或成像系统)仍应对 DNA 完整性和克隆效率产生直接的积极影响。
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