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应用领域 | 医疗卫生,环保,生物产业 |
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Midori Green Direct — 安全的 DNA 染色剂
Midori Green Direct — 安全的 DNA 染色剂 Midori Green Direct
将其放入您的样品而不是您的凝胶
MIDORI Green Direct 是一种特殊构造的荧光分子,您可以将其添加到您的样品中,而不是添加到凝胶或缓冲液中。
它将结合并标记核酸片段(DNA 或 RNA),因为它们在标准电泳运行期间分离和分解。这些标记的分子会在近乎黑色的
背景下发出明亮的光芒。相比之下,添加到熔融琼脂糖中的核酸染色剂(在凝胶浇铸之前)通常具有“双色调外观",因
为游离染料沿 DNA 片段的相反方向移动并导致凝胶底部变大。比顶部暗。当检测灵敏度或易用性是重要考虑因素时,许
多实验室更喜欢 MIDORI Green Direct。
MIDORI Green Direct 以 10X 样品上样染料的形式提供,旨在“直接"添加到您的样品中。您无需将其或任何其他染料
添加到凝胶基质或运行缓冲液中。1 mL 试管足以容纳 1,000 至 2,000 个样品(通道)。
您不仅可以使用现有的 UV 透照器和滤光片套件 — MIDORI Green Direct 与蓝色 LED 或特别是基于蓝色/绿色 LED的照
明器和凝胶文档系统配合使用时效果非常好。这些环保的光台是任何 MIDORI Green 染色剂的很好补充,因为您可以在
切除条带或成像迁移时无防护罩和无护目镜工作。由于蓝光或绿光不会交联 DNA,
因此您无需担心在克隆和拍摄过程中会损坏 DNA。
*测试您的安全
无毒。非诱变。MIDORI Green Direct Nucleic Acid Stain 是传统溴化乙锭 (EtBr) 染料的安全替代品,用于检测琼脂
糖凝胶中的 dsDNA、ssDNA 和 RNA。这种专有染色剂已通过四种不同的测试证明是安全的. MIDORI Green Direct
在 Ames 测试中导致较少的突变,这是*的致癌物和致畸剂测试的行业标准。该测试中的高致突变性通常与致癌物和致
畸物有关。安全的另一面是毒性,所有 Midori Green 污渍也是无毒的!MIDORI Green Direct *的分子结构使其无法
通过活细胞的质膜。这允许增加一层保护,因此 Direct 甚至无法对驻留在生物体细胞内的 DNA 或 RNA 分子进行制造
。水生毒性测试和腐蚀性、反应性和可燃性测试都表明 MIDORI Green Direct 不是危险废物,可以根据标准实验室程序
进行处理,使技术人员和学生在实验室中使用既方便又安全。EtBr 和其他一些“安全 DNA 染料"不被认为是无毒的,必
须以更严格的方式处理。对于那些喜欢更加安全的人来说,MIDORI Green Direct 就像Advance,也测试了乳胶/丁腈手套
渗透阴性。
三个组成一个幸福
的家庭 核心 MIDORI Green 分子已被配制成三种不同的绿色荧光染料,针对您的实验室需求进行了优化。先是 MIDO
RI Green Advance,它提供出色的信噪比和对短核酸片段的可靠灵敏度。MIDORI Green Advance 在运行样品之前添加
到琼脂糖凝胶中(很像 EtBr),当使用蓝色 LED 或 Nippon Genetics 的蓝/绿 LED 技术进行可视化时,提供与
EtBr 相当的检测灵敏度. 第二种是 MIDORI Green Direct,旨在与您的样品混合并加载到无染色凝胶上。MIDORI Green
Direct 包含上样染料,可将核酸片段检测到与 MIDORI Green Advance 相似(如果不是稍好)的水平。该系列的*成
员是 MIDORI Green Xtra。与 Advance 一样,Xtra 被添加到熔融的琼脂糖和缓冲液中。它的化学结构针对蓝/绿和蓝色
LED 灯进行了优化,从而在琼脂糖凝胶中产生优质的 DNA 和 RNA 荧光信号。MIDORI Green Advance 和
MIDORI Green Direct 染料与紫外线兼容,但在使用紫外线而不是 LED 的非破坏性可见激发光时效率略低。对于实
验室而言,重要的是,MIDORI Green Xtra 不会对琼脂糖凝胶进行染色,从而获得出色的信噪比。
对您更安全,对您的亚克隆更好
通过使用安全的 MIDORI Green 染料和安全的蓝/绿 LED 照明,您可以将亚克隆转化效率提高三倍. 在下面的示例中,
质粒载体用合适的限制性内切酶双重消化,产生两个粘性末端 DNA 片段:lacZ 基因 (3,536 bp) 和载体骨架 (4,318 bp)。
在 1% 琼脂糖凝胶上对等量的消化 DNA 进行电泳。根据相应的手册,用溴化乙锭或 MIDORI Green Direct 凝胶染料对
凝胶进行染色,然后分别使用 UV 透射仪或 FastGene 蓝/绿 LED 照明器进行观察。从凝胶上切下两个 DNA 片段并使用
基于硅胶膜的纯化试剂盒进行纯化。使用转化到 DH5a 细胞中的 T4 DNA 连接酶将 lacZ 基因和载体骨架重新连接并铺
板到选择板上。计数蓝色和白色菌落的总数以评估克隆效率。每个实验一式三份进行,并确定平均克隆效率。MIDORI
Green Direct 导致阳性转化体的显着增加。
溴化乙锭通常与强紫外光源结合使用,以在连接反应之前切除 DNA 条带以进行纯化。大家都知道的,短波长光会导致
胸腺嘧啶二聚体并破坏 DNA。这种损害的程度并不总是受到重视。高能光在几秒钟内就对 DNA 片段造成严重破坏。
如下所示,在标准琼脂糖凝胶中仅暴露 15 秒 DNA 后,克隆效率开始下降。曝光 30 秒后,你的克隆实验几乎死了!
相比之下,使用蓝色 LED 或 Nippon Genetics 的超高性能蓝色/绿色 LED 的方案的克隆效率*不受这种有害影响的
影响。如果您的实验室无法摆脱溴化乙锭的习惯,请使用蓝/绿 LED 照明器(或成像系统)仍应对 DNA 完整性和克隆
效率产生直接的积极影响。
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