AO/EB双荧光染色试剂盒

保存条件 4℃避光保存，有效期6个月。

产品简介：

吖啶橙 （Acridine Orange） 是一种荧光色素，其检测激发滤光片波长488nm，阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光，与DNA结合量少发绿色荧光，与RNA结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。溴化乙锭 （Ethidium Bromide, EB） 仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征，二者很容易在荧光显微镜下判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：1. 活细胞（VN），核染色质着绿色均匀荧光并呈正常结构；2. 早期凋亡细胞（VA），核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；3. 晚期凋亡细胞（NVA），核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状；4. 非凋亡的死亡细胞（NVN），核染色质着橘红色并呈正常结构。因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。本产品AO、EB 溶液浓度为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。

AO/EB双荧光染色试剂盒

使用方法：

1.  使用前先根据用量，将AO 溶液和EB 溶液按1:1 混合成工作液，现用现配。

2.  对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用PBS 洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的PBS；如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS 中加入20ul 工作液即可。室温放置2-5min 后于荧光显微镜下观察。

3.  对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS 中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS 中加入20ul 工作液即可。室温放置2-5min 后于荧光显微镜下观察。

注意事项：

1.  含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。

2.  染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整，以期达到最佳效果。

3.  为了您的安全和健康，请穿实验服，戴手套。

4.  操作是需要避光。