大鼠6酮前列腺素F1aELISA试剂盒

检测范围：  96T

3ng/mL –80ng/mL

使用目的：

大鼠6酮前列腺素F1aELISA试剂盒 用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中6-酮前列腺素F1α (6-Keto-PGF1α)含量。

实验原理

大鼠6酮前列腺素F1aELISA试剂盒 应用双抗体夹心法测定标本中大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)水平。用纯化的大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入6-酮前列腺素F1α (6-Keto-PGF1α)，再与HRP标记的6-酮前列腺素F1α (6-Keto-PGF1α)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的6-酮前列腺素F1α (6-Keto-PGF1α)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)浓度。

试剂盒组成

标本要求 

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

• 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

• 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
• 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
• 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
• 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
• 温育：操作同3。
• 洗涤：操作同5。
• 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
• 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
• 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

• Purpose

  This kit allows for the determination of 6-Keto-PGF1α concentrations in Rat serum, cell culture supernates and other biological fluids

  Principle of the assay

  The kit assay Rat 6-Keto-PGF1α level in the sample，use Purified Rat 6-Keto-PGF1α antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add 6-Keto-PGF1α to wells, Combined 6-Keto-PGF1α antibody which With HRP labeled,become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Rat 6-Keto-PGF1α in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.