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人脂肪间充质干细胞（P2代）产品信息：  

 人脂肪间充质干细胞（P2代）产品特性：

本产品经过中国食品药品检定研究院检定，检定项目包括细胞鉴别试验、无菌检查、分枝杆菌检查、支原体检查、细胞内外病毒因子检查、免疫学反应检测、生物学效力检测、细胞活性检测、成瘤性检查等300余项，结果符合国家食药监发布的《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》的标准要求。  

注意事项：  

在无菌条件下处理该产品；  

为确保培养效果，建议配套使用本公司专用的、冻存液等配套试剂；该产品科研使用，使用代次建议不要超过P10代。  

产品保存：   

收到产品后，检查产品是否有破损及是否处于冻存状态。若处于冻存状态，立即放置于-80℃的深低温。    

冰箱或液氮中保存；若已解冻，请拍照记录向厂家反馈情况再进行废弃。  

收到产品后，请立即放置于-80℃的深低温冰箱或液氮中至少3d后再进行复苏操作，以保证产品的稳定性和细胞活率。  

产品复苏：   

开启水浴锅预热至37℃，干细胞专用培养基提前预热至25℃左右；  

无菌条件下，吸取10ml专用培养基加入到15ml离心管中备用；  

从低温容器中取出冻存管，立即置于水浴中来回迅速摇晃，直至冻存液解冻，此过程控制在2min以内。 

注意：  

①尽可能避免水没过冻存管帽，建议用镊子夹住冻存管连续晃动，以降低污染的风险  

②2min内务必完成细胞复苏过程，时间过久会导致复苏细胞活率较差，无法贴壁  

待细胞冻存液解冻，用75%酒精擦拭冻存管的外壁后拿入超净台内

无菌条件下，迅速将细胞悬液转移至含有10ml专用培养基的离心管中，用移液管轻柔吹打混匀细胞后进行接种，按照(1-1.5)Ⅹ104cell/cm2的密度进行接种(例如：100万/管细胞可接种至3个T-25培养瓶中或1个T-75培养瓶中)  

注意：  

①由于刚复苏的细胞比较脆弱，请勿离心处理，整个操作过程保持轻柔  

②为了保证复苏培养效果，推荐使用Corning等国际的培养瓶/皿  

将培养瓶/皿置于平面上，轻柔上下左右十字摇晃5次，使细胞悬液均匀分布于培养瓶/皿中；在培养瓶/皿上方标识好细胞信息，转移至5%CO2、37℃、湿度为95%的二氧化碳培养箱中培养

注意：为了保证贴壁效果，2h请勿移动培养瓶/皿  

24h后进行全量换液处理，之后每隔2天换液一次；当细胞汇合度达到80-90%时，进行传代处理