小鼠神经干细胞（原代） 返回列表页

一、小鼠神经干细胞（原代）简介：

神经干细胞是多能干细胞，可以分化为神经系统的多种细胞，包括神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等等。神经干细胞可以从哺乳动物大脑的不同区域和脊髓等神经系统中分离出来。神经干细胞有重建神经环路的能力，因此具有治疗脑组织损伤的潜能，从而在研究神经退行性疾病动物模型、遗传性中枢神经系统疾病、中风和脊髓损伤等方面有着广泛的研究。  

本公司生产的小鼠神经干细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。  

二、小鼠神经干细胞（原代）使用方法：  

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：  

取出T25方瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时，以稳定细胞状态，然后打开瓶子回收瓶子中培养液作为后续培养此细胞的培养液（备注：先使用瓶子中培养液培养及尽快冻存保种细胞，保存种子后再尝试自己培养液培养观察是否适合此细胞生长，以免使用自己培养液不适合细胞生长造成细胞状态不好或死亡），最后按照后面细胞传代步骤进行细胞传代培养。  

2、细胞传代：  

1细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃T25方瓶中的培养液，用PBS清洗细胞3次；  

2添加0.25%消化液约2ml至培养瓶中37度培养箱放置3-5分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本脱落后加入培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm/min，离心5min；  

3弃上清，沉淀细胞用10ml培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养；  

4待细胞贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。  

3、细胞冻存：  

1细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃T25方瓶中的培养液，用PBS清洗细胞3次；  

2添加0.25%消化液约2ml至培养瓶中37度培养箱放置3-5分钟，倒置显微镜下观察，待细胞基本脱落后加入培养基终止消化，用滴管混匀并将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm/min，离心5min；  

3用适当量的冻存液（培养液：FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；  

4先将细胞冻存管放置于-20℃1h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期储存（或者按照梯度程序降温模式直接放置-80度冻存后并转移液氮中长期储存）。  

4、细胞复苏：  

1从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；  

2将冻存管中的细胞转移至含5ml培养液无菌离心管中，1000rpm离心5min，然后加入5ml培养液混匀细胞，将细胞悬液转移至T25培养瓶中，放置于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养；  

3第二天，换用新鲜培养基继续培养。