EAC-E2G8小鼠腹水瘤细胞_干细胞-上海富雨生物科技有限公司

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更新时间：2025-04-24 14:51:43浏览次数：44次

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产品名称：EAC-E2G8小鼠腹水瘤细胞、EAC-E2G8小鼠腹水瘤细胞、EAC-E2G8小鼠腹水瘤细胞、EAC-E2G8小鼠腹水瘤细胞；

常温细胞收货当天处理方式

1.收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

2.镜下观察有无微生物污染现象，拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象，方便后续售后处理。

3.用 75%酒精擦拭瓶身，置于培养箱中静置培养 2~4h 后进行传代操作。

4.观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代，请根据实际情况决定)，传代推荐比例 1：2 到 1：3（按实际收货细胞密度决定，若不确定可联系技术支持）；若细胞密度不到 80%则可取出部分培养基留 6ml 左右原瓶培养基继续培养，注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖；悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。

5.由于气温，运输等影响造成贴壁细胞漂浮的，请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代（参考附件），或及时联系技术支持进行指导传代。

6.若观察到异常或者对细胞有疑问，请及时跟代理商或者我们联系；对于细胞培养操作及培养注意事项有疑问的，可跟我们的技术支持交流。

附:收到贴壁细胞漂浮处理方法（部分细胞由于贴壁松散，会出现运输后漂浮，冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮，属于不可避免因素，正确处理后都可以正常生长）

1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞（1200rpm 3min）去除旧培养基；

2、用 PBS 重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心（1200rpm 3min）去除 PBS；

3、加入 1ml 左右 0.25%重悬细胞，混匀即可，不能吹打太多次，放入培养箱消化细胞，根据细胞特性决定消化时间（TM3、TM4、293 系列约 1~2 分钟）；

4、消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入 3-5ml 含血清的培养基混匀以终止消化，离心（1200rpm 3min）去除；

5、加入 5ml 左右的细胞相应的培养基混匀，按比例接入无菌培养瓶/皿中；

6、显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单颗细胞，若有 3-5 个成团的小细胞团可不用重新消化，使之贴壁后待细胞生长稳定后再消散细胞。

Isolation and culture of peripheral T cells

Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from old cancer patients (more than 60 years old) and young donors (25–30 years old) at Beijing Cancer Hospital (Beijing, China) were obtained by Ficoll-Paque (GE Healthcare, UK) gradient centrifugation, and then peripheral T cells (PTCs) were isolated using a Dynabeads⑥ UntouchedTM Human T Cells Kit (Thermo Fisher Scientiﬁc, USA) for the following experiments. After ﬁnishing the test of viability, PBMCs were cultured in T-cell culture medium, which consisted of X-VIVO 15 serum-free medium (Lonza, USA) appended with GlutaMAX (Thermo Fisher, USA), IL2 (50 U mL- 1; Peprotech, USA), IL-7 (10 ng mL- 1; Peprotech, USA), IL-15 (10 ng mL- 1, Peprotech, USA), OKT3 antibody (50 ng mL- 1; ACRO, USA)