HT115(DE3)大肠杆菌感_克隆与表达-上海富雨生物科技有限公司

HT115(DE3)大肠杆菌感受态细胞

产品信息：

组成 BC216-01

HT115(DE3) Competent cells 20×100µl

pUC19(0.1ng/µl） 5µl

储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。

产品说明：

HT115(DE3)是 RNase III 缺陷型大肠杆菌菌株，可以用 IPTG 诱导方法表达生产 dsRNA。用于 RNAi 干扰试验。该菌株又具备λ噬菌体

DE3 区，可以表达 T7 RNA 聚合酶，适用于含有 T7 启动子的原核表达载体（如 pET 等）的高效表达。非 T7 启动子的表达载体（如 pGEX，

pMal，pTrc 等载体）也可以在该菌株中表达。HT115(DE3)感受态细胞由特殊工艺制成，pUC19 质粒检测转化效率达 1×10 6 cfu/μg DNA。

基因型：F- mcrA mcrB, IN(rrnD-rrnE)1 rnc14::Tn10λ(DE3 lavUV5::T7 polymerase)

菌株抗性：对氨苄、、、和敏感。具有四环素抗性。

质粒转化步骤：

1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入目的质粒到细胞中，用手指管底，轻轻混匀；

2. 冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动；

3. 42℃热击 60 秒钟，不要晃动；

4. 冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动；

5. 加入 500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基；

6. 置于 37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟；

7. 取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃培养 12-16 小时。

（平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块，取 10μl

重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。）

（质粒快速转化步骤：对于氨苄抗性的质粒，将步骤 2 的时间缩短到 5 分钟，步骤 4 完成后，可直接涂布或划线于含氨苄

抗性的 LB 平板上。其它抗性的质粒仍需 60 分钟的复苏培养。）

蛋白表达步骤：

1. 挑取单菌落，接种到含 5ml 带抗生素的 LB 培养基中；

2. 37℃，200rpm 震荡培养细菌至对数生长期（OD600=0.4-0.8）；

3. 加入 IPTG 到终浓度为 0.4mM，37℃诱导 2-4 小时或 16℃诱导过夜；

4. 诱导完成后，离心收集菌体，用合适的方法（如考马斯亮蓝染胶法，Western-Blot 法或酶活性分析法）分析菌体裂解物的总蛋白、上

清和沉淀组分，明确表达产物的表达状况（可溶性或不溶性表达）；

5. 大量表达时，可用 10ml 过夜培养物转接到 1L 培养基中，当培养到 OD600=0.4-0.8 时，加入终浓度为 0.4mM 的 IPTG，37℃诱导 2-4

小时或 16℃诱导过夜。（不同蛋白表达的条件有所不同，需在实验中优化。）

E 、感受态细胞
E-1 、大肠杆菌克隆感受态细胞
货号	产品名称	规格	单位
BC101-01	0 感受态细胞	100μl ×10	包
BC101-02	0 感受态细胞	100μl ×20	包
BC102-01	DH5α 感受态细胞	100μl ×10	包
BC102-02	DH5α 感受态细胞	100μl ×20	包
BC103-01	JM109 感受态细胞	100μl ×10	包
BC103-02	JM109 感受态细胞	100μl ×20	包
BC104-01	XL1-Blue 感受态细胞	100μl ×10	包
BC104-02	XL1-Blue 感受态细胞	100μl ×20	包
BC105-01	Mach 1-T1 感受态细胞	100μl ×10	包
BC105-02	Mach 1-T1 感受态细胞	100μl ×20	包
BC117-01	Turbo 感受态细胞	100ul ×10	包
BC117-02	Turbo 感受态细胞	100ul ×20	包
BC118-01	Stable 感受态细胞	100ul ×20	包
BC106-01	DH10B 感受态细胞	100μl ×10	包
BC106-02	DH10B 感受态细胞	100μl ×20	包
BC107-01	OmniMAX2-T1 感受态细胞	100μl ×10	包
BC107-02	OmniMAX2-T1 感受态细胞	100μl ×20	包
BC108-01	Stbl3 感受态细胞	100μl ×20	包
BC115-01	Stbl4 感受态细胞	100μl ×20	包
BC109-01	XL10-Gold 感受态细胞	100μl ×20	包
BC110-01	JM110 感受态细胞	100μl ×20	包
BC111-01	DB3. 1 感受态细胞	100μl ×20	包
BC112-01	DH10BAC 感受态细胞	100μl ×20	包
BC113-01	NEB 10-beta 感受态细胞	100μl ×20	包
BC114-01	BJ5183-AD- 1 感受态细胞	100μl ×20	包
E-2 、大肠杆菌表达感受态细胞
货号	产品名称	规格	单位
BC201-01	BL21(DE3) 感受态细胞	100μl ×10	包
BC201-02	BL21(DE3) 感受态细胞	100μl ×20	包
BC202-01	BL21(DE3) pLysS 感受态细胞	100μl ×10	包
BC202-02	BL21(DE3) pLysS 感受态细胞	100μl ×20	包
BC203-01	M15 感受态细胞	100μl ×10	包
BC203-02	M15 感受态细胞	100μl ×20	包
BC204-01	Rosetta(DE3) 感受态细胞	100μl ×10	包
BC204-02	Rosetta(DE3) 感受态细胞	100μl ×20	包
BC205-01	OrigamiB(DE3) 感受态细胞	100μl ×10	包
BC205-02	OrigamiB(DE3) 感受态细胞	100ul ×20	包
BC206-01	T7 表达感受态细胞	100μl ×10	包
BC206-02	T7 表达感受态细胞	100μl ×20	包
BC207-01	T7pLysY 感受态细胞	100μl ×10	包
BC207-02	T7pLysY 感受态细胞	100μl ×20	包
BC208-01	Shuffle T7-K12 感受态细胞	100μl ×10	包
BC208-02	Shuffle T7-K12 感受态细胞	100μl ×20	包
BC209-01	Shuffle T7-B 感受态细胞	100μl ×10	包
BC209-02	Shuffle T7-B 感受态细胞	100μl ×20	包
E-3 大肠杆菌电转感受态细胞
货号	产品名称	规格	单位
BC401-01	NEB 10-beta 电转感受态细胞	50μl ×20	包
BC402-01	BJ5183 电转感受态细胞	50μl ×20	包
BC403-01	BJ5183-AD- 1 电转感受态细胞	50μl ×20	包
BC404-01	0 电转感受态细胞	50μl ×20	包
BC405-01	DH5α 电转感受态细胞	50μl ×20	包
E-4 农杆菌感受态细胞
货号	产品名称	规格	单位
BC301-01	LBA4404 农杆菌感受态细胞	100ul ×20	包
BC302-01	AGL1 农杆菌感受态细胞	100ul ×20	包
BC303-01	EHA105 农杆菌感受态细胞	100ul ×20	包
BC304-01	GV3101 农杆菌感受态细胞	100ul ×20	包
E-5 、农杆菌电转感受态细胞
货号	产品名称	规格	单位
BC305-01	LBA4404 农杆菌电转感受态细胞	50μl ×20	包
BC306-01	AGL1 农杆菌电转感受电转态细胞	50μl ×20	包
BC307-01	EHA105 农杆菌电转感受态细胞	50μl ×20	包
BC308-01	GV3101 农杆菌电转感受态细胞	50μl ×20	包

南京万木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向国内外市场专业研发、生产和销售细胞、外泌体、ELISA 试剂盒、抗体、重组蛋白及相关试剂。产品在免疫学、信号转导、代谢、神经科学等领域内都有科学文献发表，被国内外多所大学、研究机构和药学平台使用并发表文献多达1000多次。我公司凭借优异的产品和完善的服务体系现已受到广大国内外用户的青睐和认可。
品牌优势
1、产品优势：产品具有高特异性、回收率高、线性好、变异系数低、稳定性好；
2、质量保证：产品质量稳定，每批次产品必须通过 QA、QC 检测才可出库；
3、实力强大： 标准实验室、研发中心，动物房；
4、技术支持：技术部 5*8 小时技术问题及时解答；
5、服务周到：发货及时，三个工作日顺丰快递；售后无忧，包退包换。
6、研发、生产科研产品：ELISA 试剂盒：人、大小鼠、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊等多种属1000多种指标；
抗体：兔多抗、鼠单抗种类丰富，一抗 1 万余种，二抗 100 多种；
重组蛋白：多项发明，原核表达系统稳定表达蛋白 1000 余种。