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供货周期 | 现货 | 规格 | 120T |
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货号 | BA1798 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
植物总酚含量检测试剂盒
产品货号:BA1798
产品规格:120T
产品简介:
酚类物质是植物体中重要的次生物质,对植物生长发育有一定的调节作用,能够清除自由基起到抗氧化的作用,并具有较高的营养价值和医疗保健作用,同时在植物抗病、基因的诱导表达和生物固氮等方面也具有重要作用,在化妆品、食品和医药等领域具有广泛应用。酚类物质在碱性条件下能够将钨钼酸还原生成蓝色化合物,产物在760nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可定量检测植物中总酚的含量。
产品组成:
名称 | 规格 | 保存条件 | 使用说明及注意事项 |
提取液 | 液体120mLx1瓶 | 4℃ | - |
试剂一 | 液体5mLx1瓶 | 4℃ 避光 | 具有刺激性,操作时请做好防护措施 |
试剂二 | 液体8mLx1瓶 | 4℃ | - |
标准品 | 粉剂x1支 (5mg没食子酸标准品) | 4℃ 避光 | 使用前加入1mL蒸馏水充分溶解 (可50℃加热促溶,即为5mg/mL没食子酸标准液) |
标准稀释液的制备:将5mg/mL没食子酸标准液使用蒸馏水稀释至0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL即为标准稀释液。 |
序号 | A | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
稀释前浓度(mg/mL) | 5.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 0.1 | 0.05 | 0.025 |
标准液体积(μL) | 100 | 150 | 100 | 50 | 200 | 200 | 200 |
蒸馏水体积(μL) | 400 | 350 | 400 | 450 | 200 | 200 | 200 |
稀释后浓度(mg/mL) | 1.0 | 0.3 | 0.2 | 0.1 | 0.05 | 0.025 | 0.0125 |
操作步骤(仅供参考):
1. 植物总酚的提取(可根据预实验结果适当调整样本量及比例):植物样本烘干至恒重,粉碎后过30-50目筛;称取约100mg粉碎样本,加入2mL提取液,超声提取(60℃,功率300W,超声5s,间歇8s,总时间30min),12000rpm常温离心10 min,取上清即为待测样本。
2. 测定步骤:①分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至760nm,蒸馏水调零。
②在96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂:
试剂 | 测定组(μL) | 对照组(μL) | 标准组(μL) | 空白组(μL) |
待测样本 | 10 | 10 | - | - |
标准稀释液 | - | - | 10 | - |
蒸馏水 | - | - | - | 10 |
试剂一 | 50 | - | 50 | 50 |
充分混匀,25℃静置2min | ||||
试剂二 | 50 | 50 | 50 | 50 |
蒸馏水 | 90 | 140 | 90 | 90 |
充分混匀,25℃静置10min |
吸光值测定:测定760nm处吸光值,记为A测定、A对照、A标准和A空白;计算∆A测定=A测定-A对照,∆A标准=A标准-A空白。注:每个测定组均需设一个对照组,空白组只需测定1-2次。
标准曲线的建立:以0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125mg/mL为横坐标(x),以其对应的∆A标准为纵坐标(y),绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将∆A测定带入公式中得到x(mg/mL)。
3. 植物总酚含量计算
①按植物样本蛋白浓度计算
总酚含量(mg/mg prot)= x×V提取/(Cpr×V提取)=x/Cpr
②按植物样本质量计算
总酚含量(mg/g)=x×V提取/W=2×x/W
注释:V提:提取液总体积,2mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
注意事项:
1. 若测定吸光值超出标准吸光值线性范围,建议适当增加样本量或将待测样本适当稀释后再进行测定,计算时相应修改。
2. 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定。
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