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硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)

产品货号：BA1580

产品规格：100T

产品简介：

硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)检测原理是在强酸条件下，NO_3-与水杨酸反应生成硝基水杨酸，后者在碱性条件下呈黄色，其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比，以分光光度计或酶标仪测定410nm处吸光度，根据NO_3-反应的标准曲线将A₅₂₀换算成NO_3-浓度，再依据上述关系式即可计算出硝态氮含量。该试剂盒主要用于测定植物组织、血液、组织样本等中的硝态氮含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成

自备材料：

1. 蒸馏水

2. 实验材料：植物组织(大豆、玉米等叶柄)、血液等

3. 浓硫酸

4. 离心管或试管

5. 离心机

6. 比色杯

7. 分光光度计

操作步骤 (仅供参考) ：

1. 准备样品：

①植物样品：取植物组织，清洗干净，擦干，剪碎成1-2mm的碎片，加入蒸馏水，煮沸30min，冷却至室温，中速滤纸过滤，补水至，即为硝态氮提取液。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，用于硝态氮的检测。③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的硝态氮，可以使用硝态氮裂解液或蒸馏水进行恰当的稀释。

2. 配制水杨酸工作液：按水杨酸：浓硫酸=的比例，把水杨酸溶解于浓硫酸，4℃避光保存，1周有效。注意：浓硫酸为强酸，请小心操作。

3. 配制系NO_3-标准溶液：取NO_3-标准（500μg/ml）按下表继续稀释：

4. NO3-加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的硝态氮浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行管。

5. NO_3-测定：冷却至室温，以空白为对照，分光光度计(1cm光径比色杯)或酶标仪测定标准管、测定管410nm处吸光度(A_标准、A_测定)。

计算：

以系列NO_3-标准(1-5号管)浓度(μg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，制定标准曲线，根据测定管的吸光度进而计算NO_3-含量。根据如下公式计算具体样品中硝酸氮的含量：

植物组织样品硝态氮(ug/g)=C×V/m

式中:C=从标准曲线上查得的NO3-浓度(ug/ml)

V=硝态氮提取液的总体积(ml)

m=植物样品重量(g)

血清、尿液等样品硝态氮(ug/ml)=C×N×V_T/Vs

式中:C=从标准曲线上查得的NO_3-浓度(ug/ml)

V_T=提取液的总体积(ml)。

N=稀释倍数

Vs=测定时加入提取液体积(ml)

注意事项:

1. 实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于4℃。

2. NO_3- Assay buffer易挥发，请密闭保存。

3. 如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的最大检测体积。

4. 所测样本的浓度过高，应用硝态氮裂解液或蒸馏水稀释样品后重新测定。

有效期：12个月有效。