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茶多酚（TP）检测试剂盒（酒石酸铁比色法）

产品货号: BA1569

产品规格: 50T

产品简介：

茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，是一类儿茶素为主体的黄酮化合物，儿茶素占60~80%，具有C6-C3-C6碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化物质，能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁。

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物，利用茶多酚与酒石酸铁反应，生成稳定化合物，以分光光度计540nm处测定吸光度，在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比，与标准曲线比较，进而计算茶多酚含量。该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量，尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

自备材料：

1.        蒸馏水

2.        研钵

3.        离心管或试管

4.        离心机

5.        比色杯

6.        分光光度计

操作步骤（仅供参考）：

1.        配制茶多酚标准：取干净离心管或试管和茶多酚标准(1mg/ml)，按下表进行操作，依次稀释。

2.        准备样品： 

①植物样品：取植物组织，研磨成粉末。煮沸 TP Assay buffer，将0.2g粉末*加入TP Assay buffer中，沸水浴，用200目细胞筛或滤纸过滤。滤渣再继续置于新的煮沸4.5ml TP Assay buffer中，沸水浴，用200目细胞筛或滤纸过滤，合并两次滤液。5000g离心，取上清液，即为茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的检测。 

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，4℃避光保存，用于茶多酚的检测。 

③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用TP Assay buffer进行适当匀浆，5000g离心15min，取上清液，即为茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的检测。

④高浓度样品：如果样品中含有较浓度的茶多酚，可以使用TP Assay buffer进行恰当的稀释。 

3.        TP加样：按照下表设置空白管、对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的TP浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。

4.        TP测定：比色杯光径1.0cm，以空白调零，以分光光度计测定540nm处标准管、测定管的吸光度。

计算：

以系列茶多酚标准浓度(1-5号)(20、40、60、80、100μg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中TP含量。

组织样本TP含量(μg/g)=(C×V_T)/(W×V_S)

液体样本TP含量(μg/ml)=(C×VT)/V_S

V_S=测定时所用提取液的体积(ml)

注意事项:

1.        提取茶多酚时，注意提前煮沸TP Assay buffer，以便充分提取。 

2.        如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定。 

3.        每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。

有效期：6个月有效。