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谷草转氨酶（GOT）活性检测试剂盒（可见分光光度法）

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

产品货号：BA1113

产品规格：50管/24样

产品简介：

GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT在心肌细胞中含量最高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

GOT催化α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙，在碱性条件下显棕红色；测定505nm吸光度的变化，即可计算GOT酶活力。

产品内容：

提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体5mL×1瓶， 4℃保存；

试剂二：液体5mL×1瓶， 4℃保存；

试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样品测定的准备

1.        细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2.        血清（浆）样品：直接检测。

二、测定操作表

1.        分光光度计预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。

2.        在EP管中加入下列试剂：

三、计算：

1.        以相对吸光值（A测定管-A对照管）为横坐标，相应酶活力单位（U/L）为纵坐标。

作标准曲线为：y=（605.07χ2+192.86χ+0.1392）×0.482

2.        血清中GOT活力(U/L)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）。

χ为A测定管-A对照管。

3.        微生物、细胞或组织中GOT活力(U/g蛋白)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）÷待测匀浆蛋白浓度（g/L）。

χ为A测定管-A对照管。