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供货周期 | 现货 | 规格 | 50T /100T |
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货号 | BA1684 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)
产品规格:50T/100T
产品简介:
葡萄糖(Glucose,Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布*、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。
葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)检测原理是在酸性条件下,葡萄糖醛基与邻甲苯胺反应,产生希夫式碱(Schiff base),经分子重排生成蓝绿色化合物,其颜色深浅与葡萄糖浓度成正比,分光光度计505nm进行比色测定。本试剂盒专门用于血清、血浆、脑脊液、清亮的胸腹水葡萄糖检测,尤其适用严重黄疸、溶血、乳糜样血清样本的葡萄糖含量定量测定。
产品组成:
试剂名称 | 50T | 100T | 保存条件 |
试剂(A): Glu标准(5mmol/L) | 1ml | 2ml | -20℃,避光 |
试剂(B): 蛋白沉淀液 | 100ml | 200ml | 室温,避光 |
试剂(C): 邻甲苯胺显色液 | 250ml | 500ml | 4℃,避光 |
操作步骤(仅供参考):
1、普通样本处理:
①血清、血浆、脑脊液、清亮的胸腹水样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用PBS稀释后检测。
②细胞样本:
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
b、用PBS清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,间隔,重复3~5次。③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):PBS(ml)=1:9的比例,加入PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆。2500~3000g离心10min,取上清待用。
2、特殊样本处理:严重黄疸、溶血、乳糜样(脂浊)血清属于特殊样本,应使用蛋白沉淀液以制备无蛋白滤液。
3、普通样本Glu测定操作:
①按小表依次加样:
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 待测管 |
蒸馏水 | 0.1 | - | - |
Glu标准(5mmol/L) | - | 0.1 | - |
普通样本 | - | - | 0.1 |
领甲苯胺显色液 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
②充分混匀,沸水中煮沸,置于冷水中冷却。
③分光光度计测定630波长处吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
4、特殊样本Glu测定操作:
①按小表依次加样:
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 待测管 |
蛋白沉淀液 | 1.0 | 0.9 | - |
Glu标准(5mmol/L) | - | 0.1 | - |
溶血、黄疸、脂浊样本 | - | - | 0.1 |
领甲苯胺显色液 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
②充分混匀,沸水中煮沸,置于冷水中冷却。
③分光光度计测定630波长处吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
计算:
葡萄糖(mmol/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×5mmol/L
参考区间:
健康成年人空腹葡萄糖:3.89~6.11mmol/L(70~110mg/dl)
备注:Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl
注意事项:
1、上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
3、本法线性范围可达25mmol/L,如果样本葡萄糖浓度过高,结果可能呈假性降低。应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
4、沸水一定要盖过管内的液面,否则温度不均匀,影响显色结果。
5、本法受比色时间、煮沸时间等因素的影响,不宜以校正曲线法进行计算,每次检测均应同时做标准管。
6、最终反应偶尔会产生浑浊,较常见原因是血液中脂肪含量过高或冷水浴温度过低。可向3ml邻甲苯胺显色液中加入1.5ml异丙醇,所测系广东乘以1.5即可。
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