NaOH/SDS溶液 核酸类

产品货号：T11027

产品规格：2×100ml/2×500ml

产品简介：

 碱裂解法是常用的小量制备质粒DNA的方法，可用于抽提微克级别的质粒DNA。葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)、NaOH/SDS溶液和乙酸钾溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用试剂。NaOH/SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等组成，临用前等量混合使用，溶液呈碱性，是碱裂解法提DNA的重要成分。其原理是：当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，加入中和液（乙酸钾溶液）后，质粒DNA分子迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中，由于蛋白质和染色体DNA不复性而呈絮状，离心时可沉淀下来。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

操作步骤(仅供参考)：

1. 配置 NaOH/SDS 溶液：取 NaOH 溶液和 SDS 溶液等比例混合后使用，宜临用前配置。

2. 接种一个单菌落于 LB 培养基中，37℃培养至饱和状态。

3. 取 1.5ml 培养液，10000～12000g 离心 20～60s，弃上清。 

4. 用 100μl 葡萄糖-Tris-EDTA 溶液*重悬沉淀，室温静置 5min。 

5. 加入 200μl 新鲜配置的 NaOH/SDS 溶液，颠倒混匀数次，可在冰上放置 2~5min，使细胞膜破裂。 

6. 加入 150μl 乙酸钾溶液，将管温和颠倒数次混匀，见白色絮状沉淀，可在冰上放置 3~5min，此时，质量 DNA复性，染色体和蛋白质不可逆变性，形成不可溶复合物。 

7. 加入 150μl 酚氯仿异戊醇，震荡混匀，4℃12000r/min 离心 10min。继续后续实验。

注意事项：

1. NaOH 溶液呈强碱性，请小心操作，如果皮肤接触，应尽快擦干并用流水充分冲洗。 

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月。

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