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供货周期 | 现货 | 规格 | 100ml/500ml |
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货号 | G3212 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
产品货号:G3212
产品规格:100ml/500ml
产品简介:
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称 HE 染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木 精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是 DNA,在 DNA 的双螺旋结构中,两条核苷 酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键 或氢键结合而被染色。
Leagene Delafield 苏木素染液非常稳定,成熟后密封可保存 2 年。对核染色质染得很清晰细致,染色时间也 稍长。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。
染色原理:
1、 细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA,在 DNA 双螺旋结构中,两 条核苷酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以 离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、 细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合 物,细胞浆的染色与染液的 pH 值密切相关。当染液的 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质 以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞 浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。 在 HE 染色中常用盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染 色后,必须用盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色, 才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
4、 返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组 织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性 水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝, 但所需时间较长。
产品组成:
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
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Delafield苏木素染色液 | 100ml/500ml | 室温,避光 |
自备材料:
1. 盐酸乙醇分化液
2. 蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等
3. 系列乙醇
4. 伊红染色液
5. 4%多聚甲醛
操作步骤:
(一) 石蜡切片染色
1. 切片脱蜡至水
① 二甲苯作用。
② (可选)无水乙醇作用。
③ 95%的乙醇
④ 90%的乙醇
⑤ 80%的乙醇
⑥ 自来水或蒸馏水冲洗
2. 染色
① Delafield 苏木素染色液染色
② 自来水或蒸馏水冲洗
③ (可选)盐酸乙醇分化
④ 自来水冲洗
⑤ (可选)蓝化液返蓝
⑥ 自来水冲洗
⑦ 伊红染色液染色
注意事项:
1. 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
2. 盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻 底清洗酸。
3. 蓝化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促蓝液或 0.1~1%碳酸锂溶液。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:24个月有效。
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