2× FastPfu Premix 酶

2× FastPfu Premix 酶

是将PCR反应中用到的高保真FastPfu DNA聚合酶、buffer、dNTP Mixture以及稳定剂以2倍的终浓度进行混合。使用时，只需要在制品溶液中加入模板和引物便可进行PCR反应，大大简化了操作过程，降低了PCR操作过程中污染的可能性。

 2× FastPfu Premix 酶 

1. 在冰浴上设置 PCR 反应（供参考）*：

模板: < 500 ng

2× Tolo FastPfu Premix: 25 μL

Primer 1/2: 0.2 - 1.0 μM (final conc.)

灭菌蒸馏水 Up to 50 μL

2. PCR 反应参数（供参考）**：

(起始变性): 95 ℃  5 min

(解链): 98 ℃  5 sec

(退火): 55 ℃ 30 sec

(延伸): 72 ℃ x min （30-35 循环：2 kb/min）

(终延伸): 72 ℃  7 min

(临时保存): 16 ℃ 保温

(终延伸): 72 ℃ 10 min 

* 针对不同类型的模板，所需的模板量会有不同，如基因组和质粒，等等；需要根据实际情况，添加合适的模板量。

** 退火温度需根据引物和模板实际的 G+C 含量来作调