称取本品0.4g，加入0.5g L-氨基酸（或盐酸盐），溶解于100mL蒸馏水中，用1mol/L的盐酸或氢氧化钠调节pH，使灭菌后在6.8左右（不同形式的氨基酸pH不同，因此加入氨基酸后需对培养基的pH进行调整），分装于试管，并覆盖液体石蜡，121℃灭菌15min，冷却后备用。

注意事项：1.氨基酸有L型和D型，通常需要使用的是L型氨基酸，若使用的氨基酸为L型D型混合的，配制培养基时需将氨基酸的量加倍（即添加量为1g/100mL）；2.不同的氨基酸pH有差异，一般呈碱性，但市场上售卖的氨基酸多为盐酸盐形式（盐酸盐形式的氨基酸更为稳定，不易变质），一般呈酸性，因此配制培养基时，加入氨基酸后必须对培养基的pH进行调整；3.在厌氧环境下更有利于保存细菌分解葡萄糖产生的酸，及促进氨基酸脱羧酶的产生，因此需覆盖液体石蜡隔绝氧气，不覆盖石蜡有可能导致结果不正确。4.有些细菌的氨基酸脱羧酶产生较慢，因此在遇到阴性试验结果时，有时需延长培养数天才可观察到阳性结果。5.本试验的原理是细菌前期分解葡萄糖产酸，后期分解氨基酸产碱，培养基呈现由紫色变黄再变紫的过程，最终阳性结果为紫色，但有些细菌不能分解葡萄糖产酸，培养基全程都是紫色，此时容易误判为阳性结果，因此在进行氨基酸脱羧酶试验是，需要同时接种对照管（即不添加氨基酸的培养基管），当对照管与试验管均为黄色时为阴性反应，当对照管为黄色，试验管为紫色时，为阳性反应，若对照管未变黄，说明细菌为产碱型或氧化型，不能直接判断阴阳性。