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HEPG2人肝癌细胞含（str）
细胞名称 | HEPG2人肝癌细胞含（str） |
种属 | 人 |
细胞来源 | ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
传代 | 1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养ye去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换ye以及传代，一般2天换一次ye； 2.待细胞长满瓶底面积80%，需要对其进行传代，传代比例为1:2到1:3； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化ye置于室温预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（*次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*消化时间，记录*消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml*培养基终止消化。用移ye枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬ye，1000rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。（具体根据随货说明书进行操作） |
保存 | 冻存条件：*培养基+FBS+DMSO (备注：建议使用本公司的培养条件，用4度保存的冷冻ye直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：yedan存储 |
供应限制 | 仅供研究之用 |
常见问题及解决方案 | 1.培养瓶有破裂，培养ye有漏ye：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间长不宜超过 72 小时） 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养ye培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养ye继续培养，中间注意观察， |
细胞培养的概念：
细胞培养也叫细胞克隆技来术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个*的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术*的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可源以说细胞培养技术是生物技术中核心、基础的技术。
细胞培养成功的关键因素：1.要保证无菌,包括无菌操作,无菌环境.枪头等要及时灭菌,培养瓶,移液管使用一次性的,如果你的细胞比较不好养,要使用一次性的.2.要传代的时候细胞传代的数量不能百太少,否则度细胞不容易养活.另外,传代不要过度频繁,即使是肿瘤细胞.3.不要经常用胰酶消化细胞,且消化时间不要过长.4.根据细胞生长情况,即使更换新鲜培养基.5.血清一般要冻存在-20摄氏度,用的时候在4摄氏度融化,不要反复冻存,用10ml的离心管分装使用.
细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术*来的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。
细胞培养成功需注意三个方面：
1）物质营养，体外培养细胞所需自的营养是由培养基提供的。培养基中通常需要含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和百微量元素。其中重要的是血清，含有促进细胞生长的生长因子。
2）生存条件，体外细胞培养必须模拟体内生长环境，包括无菌环境、适宜的温度、一定度的渗透压和气体环境（CO2和O2）
3）废物代谢，培养基上细胞代谢产生的代谢物和废物累积在培养基中阻碍细胞的生长，所有应定期更换培养基。
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