1. 皮革水解蛋白含量检测使用说明书

【简介】

皮革粉就是将生产皮衣、皮箱、皮鞋、皮沙发、皮包等皮具时剩下的边角料，经过化学处理后，水解出蛋白，再加一些香精、色素等原料而制得的皮革水解产物，由于动物的皮毛成分是蛋白质，因此皮革水解产物被称为皮革水解蛋白。这种产品含有危害人体健康的重金属六价铬，不能用于食品加工。通过皮革水解提取氨基酸肽和氨基酸液，它是一种致癌物。不法分子将其添加到食品中的目的主要是提高蛋白质含量，通常将其掺入到生鲜乳中增加生鲜乳蛋白质的含量，但会改变生鲜乳的口感及氨基酸的组成，降低生鲜乳中氨基酸的吸收利用率，尤其“鞣革”下角废料中含有的重金属铬，如果被人体吸收蓄积，可导致关节疏松、关节肿大、造成人体重金属中毒。

皮革水解蛋白非法添加的主要对象为乳与乳制品、含乳饮料。它与三聚氰胺不同，三聚氰胺俗称“蛋白精”，但并非真正的蛋白质，而皮革水解物是真正的蛋白质，若添加到食品当中，检测起来难度更大。由于L-经脯氨酸是动物皮骨的胶原蛋白构成的特征氨基酸，通过水解可以将乳蛋白和其他动物皮骨的胶原蛋白区别开来，因此可以通过检测—L-经脯氨酸含量来判断是否有皮革水解蛋白。

【检测原理】

通过对L(-)-羟脯氨酸含量的测定，可判定是否为动物水解蛋白。皮革水解蛋白中的羟脯氨酸经过提取，与检测试剂反应生成有色化合物，用检测仪测定其吸光度，在一定范围内吸光度与含量成正比。

【检测范围】

乳制品等

【自备试剂】

氯化亚锡、浓盐酸、对二甲氨基苯jia醛、高氯酸、异丙醇；

① 氯化亚锡溶ye：7.5g氯化亚锡溶液水中，再加入500ml浓盐酸；

② 显色剂：10g对二甲氨基苯jia醛，用35ml高氯酸溶解，加入65ml异丙醇。

【技术指标】

检测下限：1mg/kg

【操作方法】

①样品处理：准确称取样品2g放入250mL磨口三角瓶（自备）中。加几粒沸石，加入氯化亚锡溶液100mL,置于水浴上加热回流16h。趁热将水解溶液过滤于200mL容量瓶中,用6moL/L热盐酸10mL反复三次冲洗三角瓶和滤纸,冷却,用水定容到刻度,混匀。吸取5mL水解液于100mL烧杯中,用10mol/L、1mol/L氢氧化钠溶液调节pH为8左右,过滤于250mL容量瓶中,用30mL水冲洗烧杯和滤纸上的氢氧化亚锡沉淀,反复三次,把洗液并入滤液中,以水洗至刻度,摇匀备用。

② 取两支试管，试管1中加入2.0mL蒸馏水，试管2中加入2.0mL样品处理溶液。

③ 分别向两支试管中加入1.0 mL皮革水解蛋白检测液A，摇匀后于室温放置20min，再分别加入1.0 mL显色剂，摇匀，塞上塞子于60℃水浴加热20min后取出,迅速冷却。将试管1倒入比色皿，将比色皿放入通道，按“对照测量”。 将试管2倒入比色皿，将比色皿放入通道中，按“样品测量”。

【执行标准】

因L(-)-羟脯氨酸为胶原蛋白中的*组分，其含量占10%以上；而乳蛋白中不含有此成分，如若样品中含有L(-)-羟脯氨酸，可判定添加了动物水解蛋白。

【注意事项】

① 所用的检测液对皮肤均具有不同程度的伤害，使用时请做好防护。不慎沾到皮肤应立即插干并用大量水冲洗

② 检测试剂需阴凉处避光保存，冰箱2~5℃保存最佳。

③ 上述检测试剂为强腐蚀性，高危险试剂，需自行配制，配制过程请做好防护，例如佩戴防护手套等。