MagVigen™-链霉亲和素磁性纳米粒子可以通过链霉亲和素和生物素之间的高亲和力相互作用普遍结合任何生物素化的生物分子（例如抗体、蛋白质、肽、DNA）。使用磁力架 (Cat#A20006) 可以轻松地将 MagVigen™-链霉亲和素-生物素-生物分子复合物与未结合的生物素-生物分子分离。这提供了一种使用磁性纳米颗粒标记生物分子的快速而简洁的方法。纯化的纳米颗粒-生物分子复合物可用于各种下游生物分离过程（例如蛋白质纯化、免疫沉淀、细胞分离或去除以及分子检测）。
MagVigen™-链霉亲和素非常适合与小鼠抗体一起使用，从组织或器官获得的细胞群混合物中分离细胞（例如 CTC、干细胞）。分离的细胞具有活性，可以进一步培养或用于下游分子分析，例如 mRNA 分离和 RT-PCR。使用 MagVigen™ 纳米颗粒进行细胞分离无需使用柱，因此细胞不会因穿过柱基质而受到机械应力。磁力分离的细胞高度纯化并保留其活力，非常适合下游应用。
轻松快速地制备纳米颗粒-小鼠一抗偶联物
简单、温和的细胞分离
强烈而持久的荧光信号
一致、高质量的结果
高结合能力
高生物相容性
低非特异性结合
目录号 21005C：MagVigen™-链霉亲和素以含有 0.02% NaN3、0.02% BSA 的磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 形式提供。 pH 7.4。每瓶含有 1 ml 颗粒浓度为 2 mg/ml 的溶液，足以结合 10 9个细胞。
纳米颗粒尺寸：200-500 nm，使用动态光散射测量。
多分散指数<0.2。
容量： 50μg生物素抗体/ml纳米颗粒
目录号 K21005C 还包括：
洗涤缓冲液
洗脱缓冲液
除磁铁外的所有材料均应储存在 4°C 下。
保质期：6个月
该方案提供了使用 MagVigen™-链霉亲和素磁性纳米粒子富集 10 5 -10 6细胞的一般指导。请根据具体应用调整试剂用量。
使用前轻轻涡旋或移液管中的 MagVigen™-链霉亲和素磁性纳米颗粒。
等分 20-50 μl 纳米颗粒溶液用于富集实验。
注意： 20-50 μl 通常足以富集 10 5 -10 6 个细胞。细胞捕获效率可能受到多种因素的影响，例如细胞群中靶细胞的频率、细胞表面表达的抗原/表位的密度以及抗体亲和力。相应地调整纳米颗粒的量。
用 500 μl 洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒两次。将磁铁放在管的侧面 1-2 分钟，然后小心地除去上清液（磁铁仍在侧面），将纳米颗粒与溶液分离。
将 1μg-2μg 生物素偶联抗体（体积为 100-200 μl）添加到纳米颗粒中，并在旋转器上孵育 30-60 分钟。
注： 50 μl 纳米颗粒可结合约 2μg 抗体。
用 500 μl 洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒-抗体缀合物两次，以去除未结合的抗体。
将纳米颗粒-抗体缀合物重悬于洗涤缓冲液 (50 μl) 中，并将其添加到细胞样品中，使总体积为 0.1-0.5 ml。
将纳米颗粒与细胞样品在轨道摇床上室温孵育 30 分钟。
孵育后，使用磁铁将纳米粒子（与结合的细胞）从溶液中分离，并小心地除去上清液。
用500μl细胞培养基洗涤纳米粒子-细胞复合物两次。
分离的细胞可以重悬于细胞培养基中以用于下游应用。
注意： 洗脱缓冲液可用于从 MagVigen™-链霉亲和素磁性纳米颗粒中洗脱目标蛋白或细胞。
MagVigen™ 纳米颗粒能够通过免疫沉淀测定来鉴定新的蛋白质-蛋白质相互作用，其中 MagVigen™ 链霉亲和素生物素-抗体复合物可用于从测定样品（例如细胞裂解物）中分离特定的目标蛋白质或蛋白质复合物。免疫沉淀的蛋白质可以通过电泳、蛋白质染色和质谱进一步分析。 MagVigen™ 纳米颗粒比传统微珠小得多。这一特征使得纳米颗粒能够更好地接触抗原表位，并且减少对蛋白质或蛋白质-蛋白质复合物的天然功能的干扰。此外，MagVigen™ 纳米颗粒的表面经过涂层，可减少与细胞蛋白质和其他生物分子的非特异性相互作用。此功能允许更具体地“下拉"真正的蛋白质复合物靶标。
为了获得纳米颗粒的最佳结果，建议在添加到样品中之前清洗纳米颗粒。
涡旋 MagVigen™ 纳米粒子 10-20 秒。
取 50μl 纳米颗粒溶液，加入 100μl 1X Washing Buffer，涡旋混匀。
将磁铁放在管的侧面 2-5 分钟，然后小心地除去上清液（磁铁仍位于侧面），将纳米颗粒与溶液分离。
注意： 在微量离心管的侧面应该可以看到含有深棕色纳米粒子的透明沉淀。
洗涤纳米颗粒 2 次。
将 2 μg 生物素抗体（或按照公司方案推荐的量）添加到含有细胞裂解物的试管中。
在冰上孵育一小时。
将 50μl 预洗的 MagVigen™ 纳米粒子添加到管中。在 4°C 下旋转 2 小时。
用磁铁将纳米颗粒与样品溶液（细胞裂解物）分离。除去上清液。
用所用的50μl裂解缓冲液清洗纳米粒子3次。
最后一次洗涤后，除去上清液，并向珠子中添加 100μl 洗脱缓冲液。
涡旋并孵育 5 分钟。
从溶液中磁性分离纳米颗粒。收集上清液，同时避免干扰珠粒。目标蛋白位于上清液中，可供分析。
使用前轻轻涡旋或移液管中的 MagVigen™-链霉亲和素磁性纳米颗粒。
等分 50 μl 纳米颗粒溶液用于富集实验。
注： 50 μl 一般足以富集 1-10×10 5外泌体。外泌体捕获效率可能受到样品中外泌体频率、外泌体表面表达的抗原/表位密度以及抗体亲和力等因素的影响。相应地调整纳米颗粒的量。
用 500 μl 洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒两次。将磁铁放在管的侧面 1-2 分钟，然后小心地除去上清液（磁铁仍在侧面），将纳米颗粒与溶液分离。
将 500 ng 生物素偶联抗体（体积为 100-200 μl）添加到纳米颗粒中，并在旋转器上孵育 30-60 分钟。
注意： 50 μl 纳米颗粒可以结合约 200 ng 的抗体。
用 500 μl 洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒-抗体缀合物两次，以去除未结合的抗体。
将纳米颗粒-抗体缀合物重悬于洗涤缓冲液 (50 μl) 中，并将其添加到细胞样品中，使总体积为 0.1-0.5 ml。
将纳米颗粒与预富集的外泌体样品在轨道摇床上于 2°C™ 8°C 下孵育 2 小时或过夜。
孵育后，使用磁铁将纳米颗粒（带有结合的外泌体）从溶液中分离出来，并小心地除去上清液。
用 500μl 洗涤缓冲液洗涤纳米颗粒-外泌体复合物。
外泌体结合的纳米粒子现已准备好进行外泌体裂解、凝胶电泳和蛋白质印迹分析。
提供商 |
上海牧荣生物科技有限公司 | 下载次数 |
0次 |
资料大小 |
485KB | 资料类型 |
PDF 文件 |
资料图片 |
-- | 浏览次数 |
43次 |
4
立即询价
您提交后，专属客服将第一时间为您服务