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EIGHT (8)测试样品中的光聚集和 Ristocetin 辅因子测试

CHRONO-LOG 型号4904 + 4光学聚合系统现已推出(4)或(8)通道配置，由一个或两个4通道模块组成: 型号4904 +-可单独购买，包括测试通道(1)至(4) ，内部 AGGRO/LINK 计算机接口与(2)软件包... AGGRO/LINK Opti8用于执行聚合，vW CoFactor Opti8用于执行 Ristocetin 辅因子测试，外加一套试剂和初始用品。型号490 + 4-扩展4通道模块到(8)通道... 测试通道(5)通过(8) ... 只需要一个单一的互连电缆。型号4904 + 4-一个完整的8通道系统[2,4通道模块]

样品体积-250μL [不需要间隔]或500μL 连续监测，并发出警告信息: 温度、搅拌速度和超量程检测，以防止在基线未设置的情况下操作。带按钮设置的液晶显示器用新的校准改进光学电路的校准用定制/可选的跟踪颜色

使用新型 CHRONO-LOG 型号4904 + 48通道光学聚集系统，在 LTA 血小板聚集试验上花费了太多的时间、样品和试剂

怎么做到的？减少抽血量... 理想的小样本，因为每次测试只需要250μL 的 PRP，每次测试使用更少的试剂... 省钱！提高周转时间... 一(1)运行和完成！使用(2)自动数据处理，(1)胶原蛋白，(1)花生四烯酸，(1)肾上腺素，(2)里斯托西汀和(1)其他试剂进行测试。保持准确性... 以及你期望的可靠性，通过改进光学电路的自校准 Chrono-log

临床应用: 血管性血友病的诊断研究抗血小板治疗的监测效果

研究应用: 血小板研究药物研究用丙酸钠，洗涤或凝胶过滤血小板检测肝素诱导的低血小板计数

测试通道: 4个通道[一个模块]或8个通道[两个，四个通道模块]与: 光聚集测试 PRP，凝胶过滤或洗涤血小板超量程检测，以防止操作，如果基线没有设定。前面板显示和控制: 液晶显示-24个字符 x 2行液晶显示，每个通道显示一个: 显示温度摄氏度，搅拌转速，PPP/参考选择，校准模式和警告信息。设置基线按钮-将聚合基线设置为0% 。选择按钮-选择温度，搅拌速度和 PPP/参考[一个按钮选择(2)通道]。设置按钮-调整温度，搅拌速度和 PPP/参考[一个按钮设置(2)渠道]。校准开关. 光学电路的按键激活校准。加热器块-电子控制可设置在35.0 oC 和39.0 oC 之间的0.1 oC 的步骤。搅拌器-400至1200转每分钟在100转每分钟的步骤与“搅拌停止"的立场。

试样体积: 250uL 或500uL 样品[微量试验不需要间隔]试管: P/N 312搅拌棒: 可重复使用的聚四氟乙烯涂层 P/N 313，一次性 P/N 311通用规格(每个模块) : 功率要求-开关可选115或230伏交流电; 50/60赫兹，最大150瓦特。尺寸-14英寸(35.5厘米)宽，8.5英寸(21.6厘米)高，15英寸(38厘米)深重-19.3磅。(8.75公斤)孵化井-每个通道2个井，每个井@36.5 oC + 1.0 oC，当温度设定在37 oC 时输出: 系列: 内部 AGGRO/LINK 接口，用于计算机和 AGGRO/LINK 以及 vW CoFactor Opti8软件。模拟: 后底盘上的连接器，用于与条形图记录器的接口。

在1.0 mL 样品中——通常为450μL 血液，用450μL 生理盐水加100μL CHRONO-LUME 试剂稀释，当用 Ristocetin 测试时，没有 CHRONO-LUME 的1.0 mL 血液样品。* * 在用 Ristocetin 测试时，在500μL 样品-通常为450μL 富含血小板的血浆加50μL CHRONO-LUME 试剂或没有 CHRONO-LUME 的500μL 富含血小板的血浆中。(对于250μL 微体积的样品，用 P/N 365橡胶垫片以半衰期法减少体积。)注释单位，注释单位，注释单位，注释单位，注释单位。最终指令。每单位测试容量每个测试单位 WB/PRP WB/PRP * PRP * * WB PRP386凝酶1.0 mL 10 Unit/mL 1 Unit 100μL50μL1020385胶原1.0 mL 1mg/mL 2μg/mL 2μL1μL5001000390花生四烯酸0.7 mL 50 mM 0.5 mM 10μL5μL70140396 Ristocetin 0.5 mL 125 mg/mL 1.0 mg/mL/8μL5μL621001.25 mg/mL395 Chrono-lume 4x1.25 mL N/A N/A 100μL50100384ADP5.0 mL 1mM10μL5μL5001000393肾上腺素5.0 mL/50 mL 10mM/1mM50μM/5μM5μL2.5 μL10001000387 ATP 标准5.0 mL 2μmol2nmol 5μL5μL10001000导电测试注意: 不需要多种库存溶液。要改变最终浓度，调整移液管容量。

由于每次测试只需要微量的试剂，因此必须避免引入过量的试剂。因此，在抽取试剂后擦拭微量移液管端外侧，以除去附着在端外侧的多余试剂。不要将试剂放入试管上方或试管侧面，因为试剂会附着在试管侧面，不会与样品混合。使用 AGGRO/LINK 与 Windows 兼容软件和遵循 NCCLS GP2-A3格式的程序可在磁盘上或通过电子邮件获得: •全血聚集•全血聚集与 ATP 释放• PRP 光聚集•光聚集与 ATP 释放控制和患者样本-收集已知影响血小板和患者样本的药物的正常控制，将其收集到无菌真空管中，不可湿衬里和1/10体积的3.2% 缓冲柠檬酸钠。抽取20-30毫升血液进行光学 PRP 检测，或抽取5-10毫升血液进行全血检测。

参考文献(1) Ingerman-Wojenski CM 和 Silver MJ: 一种用全血光度计快速筛查血小板功能障碍的方法。1984年止带51-2(154-156)。(2) White M MC，Jennings LK: 血小板方案: 研究和临床实验室程序。学术出版社，1999年。(3) Podczasy JJ，Lee J，Vucenik I: 全血光聚集的评价。克林 · 阿普尔。血栓/止血，3(3) : 190-195,1997。(4) Sweeney JD，Hoernig LA，Michnik A 和 Fitzpatrick JE: 全血聚集测定法。样本采集和学习成绩延迟对测试结果的影响。Am J ClinPathol 1989; 92:676-679.(5) Feinman RD，Detwiler TC 和 Ingerman-Wojenski C: 作为研究和临床工具的 Lumi 聚合度计。生理学和药理学。版权所有1985年由学术出版社公司(6) Sirridge，M: 出血病人的实验室评估。临床检验医学，第4卷，第2期，1984年6月。(7) Nieuwenhuis HK，Akkerman J-W N 和 Sixma JJ: 出血时间延长和聚集测试正常的患者可能存在储存池缺陷: 对106名患者的研究。血70-3(620-623)1987。(8) Sweeney JD，Hoernig LA and Fitzpatrick JE: 血管性血友病中的全血聚集。Am J Hematol 32:190-193(1989).(9) UMDNJ，Spec.新不伦瑞克止血实验室。

(10) Sweeney JD，Hoernig LA，Behrens AN，Novak E，and Swank RT: Von Willebrand’s Variant (type II Buffalo)。美国临床病理学杂志，第93卷，第4期，(522-525)1990年。(11) Miller JL: 血小板型血管性血友病。血栓和止血第7卷，第4期，1985年。(12) Taylor ML，Misso NLA，Stewart GA，Thompson PJ: 不同剂量的阿匹林对 PAF，胶原蛋白和花生四烯酸诱导的人血小板活化的影响.Br J Clin Pharm. ，(1992) ，33,25-31。(13)兰辛英厄姆医疗中心。(14) Riess H，Braun G，Brehm G 和 Hiller E: 人全血血小板聚集的评价。我是 J ClinPathol。第85卷，第1期，(50-56)1986。(15) Gengo FM，Rainka M，Robson M，Gengo MF，Forrest a，Hourihane M 和 Bates v: 接受二级卒中预防治疗的患者和复发性缺血事件患者中血小板对阿匹林无反应的患病率。克林药理学杂志，第48卷，第3期，335-343页，2008年。(16) Pyle-Eilola，Amy L. ; Carter，Chris M. ; Cucci，Jodi; Chandler，Wayne L: 全血发光血小板聚集测定参考区间的建立。AACC 2017年海报。

引言 CHRONO-PAR 和 CHRONO-LUME 试剂用于确认正常血小板功能和诊断血小板功能障碍。以下 CHRONO-PAR 和 CHRONO-LUME 试剂适用于全血和血小板富血浆: ADP (P/N 384)-在 PRP 中，低浓度(< 1μM) ，形状变化之后是原发性聚集和解聚。在较高浓度的1-5μM 时，通常可以看到双相反应。第二波聚集需要血栓素 A2的合成，并受环氧化酶抑制剂如阿匹林的影响。ADP 在全血中的聚集需要更高浓度的 ADP (通常为5-20μM)。

花生四烯酸(P/N 390)-前列腺素合成的直接测试，因为聚集需要通过环氧化酶转化为血栓素 a 2，这一过程被阿匹林抑制。从没有聚集到低于正常范围的反应通常表明药物摄入在前几天的某个时间。 ATP 标准(P/N 387)-用于定量 ATP 释放。提供2μmol 冻干的5’三磷酸腺苷。5μL 加入任何大小的测试样品提供2nmol 标准。 CHRONO-LUME (P/N 395)-用于定量 ATP 释放在阿匹林检测中的使用和储存池和分泌障碍的诊断。荧光素-荧光素酶与 ATP 结合，产生光，这与测试样品中血小板释放的 ATP 量成正比。注意: CHRONO-LUME 反应是时间和温度依赖性的。在开始测试之前，确保每个样品只有两分钟的温育时间。胶原蛋白(P/N 385)-测试样品加入试剂后出现滞后期，在此期间胶原蛋白聚合成纤维以激活血小板。低浓度的胶原蛋白(1-2μg/mL)被环氧合酶抑制剂如阿匹林抑制; 正常情况下，较高浓度(5μg/mL)不受影响。肾上腺素(P/N 393)-该激动剂未见形状变化。较高浓度(≥5μM)产生依赖于血栓素 A2合成的第二波聚集的双相曲线。临床上不推荐使用肾上腺素作为全血检测的标准激动剂，因为只有不到50% 的激动剂对这种非常弱的激动剂有反应。肾上腺素全血测试的推荐抗凝柠檬酸钠为1.5% ，每毫升柠檬酸盐含2 U 肝素。

Ristocetin (P/N 396)-用于检测血管性血友病(血管性血友病因子的定量或定性缺陷)和巨大血小板综合征(缺乏血小板膜糖蛋白 GPIb)和具有聚集-解聚模式的格兰兹曼氏血小板减少症。Ristocetin 的结果也可能受到阿匹林的影响。凝酶(P/N 386)-用于1U/mL 时的最大 ATP 释放量的定量，不用于聚集。凝酶的分泌与血栓素的合成无关。凝酶分泌减少可能表明储存池缺乏或分泌缺陷。注意: CHRONO-PAR 试剂在环境温度下运输。到达后，按照建议存放。

所需但未提供的材料1。聚合度计2。杯子3。搅拌巴斯4。微量移液管-可调节从0.5 μL 到100μL 所需的试剂。5。血液样本所需的移液管-100μL 至1mL。6。CHRONO-LOG P/N 397生理盐水或无菌生理盐水(0.85% 或0.9% w/v)用于 CHRONOPAR 试剂制备和全血标本稀释避免血库盐水，因为它可能是不正确的摩尔比。细胞计数器稀释剂不合适，因为它们含有 EDTA，可以抑制血小板聚集。输液盐水是不合适的，因为它们含有苄醇或其他抑制血小板功能的防腐剂/添加剂。7。CHRONO-LOG P/N 398纯净水或无菌瓶装蒸馏水适用于 CHRONO-PAR 试剂的制备。重组试剂应无热原(不含 ATP) ，不含防腐剂，如抑制血小板功能的苯甲醇。不要使用 Millipore 系统中的水。8。用于在适当温度下保持重组工作试剂的冰。9。塑料圆锥管10。KimWipes 11.电极组件[可重复使用]12。电极组件[一次性]ー参见试剂说明书。

结果的解释血液和 PRP 中的聚集和发光 ATP 分泌曲线可以解释如下: 通过直接比较一个正常的无药物控制，也提供实时质量控制。与可由任何实验室核实和复制的公布的正常值进行比较。胶原蛋白或花生四烯酸释放的三磷酸腺苷相当于或超过凝酶释放量的50% 。•在对106名储存池缺陷(SPD)患者的研究中，23% 对 ADP，肾上腺素和胶原有正常的光学(PRP)聚集反应; 44% 有各种聚集异常。作者的结论是，SPD 是常见的，不均匀的，并不一定与光学(PRP)聚集异常有关。7•同时测量聚集和 ATP 释放提供了密集颗粒分泌的明确证据。5据报道，应考虑的储存池缺陷阈值小于0.5 nmoleATP 对1U 凝酶的反应。4局限性•应在静脉穿刺3小时内进行测试。•许多药物抑制血小板功能。除非检测的目的是证明药物引起的抑制作用，否则患者应在检测前两周内不服用已知会影响血小板的药物。•血小板计数 < 225,000/μL，运行 ADP 测试 UNDILUTED。可能需要进一步的临床和实验室评估来确认诊断。质量控制良好的实验室实践是，每当试剂组成或解冻时，运行一个正常的供体，不含已知会影响血小板的药物。不能证明在正常对照中聚集和释放已知会影响血小板的药物的保质期之前和按指示储存和重组的保质期试剂，可以免费更换。本保修条款仅适用于美国。

 

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