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惠诚生物现货供应LbuCas13a核酸酶

LbuCas13a是一种来源于细菌 Leptotrichia buccalis的Cas13a效应蛋白。它属于IV型CRISPR-Cas系统，可利用CRISPR RNA(crRNA)来识别和切割RNA。LbuCas13a相对分子质量约为132kDa。它包含两个高度保守的结构域：HEPN和RuvC，与crRNA结合后可激活其内切酶活性，对RNA进行切割。

本产品由E.coli表达的重组蛋白，是将蛋白基因接入稳定表达载体，经克隆筛选，质量验证，挑选的稳定表达株，由化学成分确定的培养基（不含有任何动物源成分）发酵制备，工艺稳定，保证了产品质量及批次间的一致性。

规格参数：

货号：EH0506

规格：100/500pmol.

为工业客户提供n*1000pmol规格

质量控制:

纯      度:

经高效液相色谱（SEC-HPLC）和SDS-PAGE检测，纯度大于95%.

惠诚生物现货供应LbuCas13a核酸酶

使用说明：

长期储存于-80℃，首(空)次使用后保存于-20℃,避免反复冻融。

技术原理:

LbuCas13a通过碱基配对识别crRNA和目标RNA之间的同源序列，与之结合后激活，在目标RNA进一步切割其他区域，这被称为“异核酶的自恢复特征"。该过程可导致高效的RNA分解。

特点与优势:

(1) LbuCas13a可特异性识别和切割RNA，而非DNA，这令其成为CRISPR系统中首(空)个RNA靶向的工具。

(2) LbuCas13a具有RNA的自恢复切割功能，可导致RNA高效降解，这有利于RNA的功能研究及基于RNA的治疗方法的开发。

(3) LbuCas13a对温度和离子环境不太敏感，在宽范围的条件下保持稳定和活性，易于保存及操作。

(4) LbuCas13a可识别不同长度(约23-38 bp)的crRNA，这为其RNA靶向带来更高的灵活性。

LbuCas13a在以下方面具有重要应用潜力:

(1) RNA功能研究：实现特定RNA的敲除与破坏，用于研究RNA在生物体中的生理功能。

(2) RNA病毒检测与治疗：可用于检测和抑制RNA病毒的增殖。

(3) 离体和在体基因治疗：利用LbuCas13a表达载体传递crRNA，抑制靶细胞内的病理性RNA。

(4) 体外RNA检测：设计与靶RNA同源的crRNA，检测样本中靶RNA的存在与表达水平。

(5) 农业病害治疗：抑制植物病原体中的关键RNA，达到防治作用。

LbuCas13a在体外诊断领域有重要的应用潜力：

1. RNA病毒检测

设计与RNA病毒基因组高度保守的区域互补的crRNA，可特异性检测该病毒的存在，用于临床病毒性疾病的快速诊断。

2. 体外RNA表达检测

针对特定RNA标记物设计crRNA，可检测样本中靶RNA的表达水平，用于癌症诊断、疾病检测等。

工作流程如下:

(1) 设计与靶RNA高度同源的crRNA序列。

(2) 将crRNA与待检测样本RNA共孵育。

(3) 如果存在互补的靶RNA，LbuCas13a与之结合并激活，对靶RNA进行切割。

(4) 通过qPCR检测LbuCas13a切割产物或其活性，判断靶RNA的存在与表达量。

(5) 该方法灵敏度高、特异性强,可实现RNA的高通量检测，相比传统方法更加简便快速。

3. 细胞RNA谱检测

利用LbuCas13a及对应的crRNA库，可以检测细胞中全 transcriptome RNA的表达变化，用于药理学研究、疾病诊断等。

4. 病原体RNA检测

针对病毒、细菌等病原体的保守RNA区域设计crRNA，实现特异性病原体检测，用于临床快速诊断。

5. 非编码RNA检测

设计与靶向miRNA、lncRNA等互补的crRNA，实现非编码RNA的高通量检测与定量分析。

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