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核酸外切酶IV惠诚生物Exonuclease IV

核酸外切酶 IV Exonuclease IV来源于大肠杆菌，属于IV型外切酶家族。Exonuclease IV是一个环状的四聚体，每个单体包含约290个氨基酸。核酸外切酶 IV Exonuclease IV是一种双链特异性的外切酶，可从DNA的3'端切除核苷酸，产生3'突出的单链区域和5'磷酸化的DNA断端。Exonuclease IV是研究DNA二级结构与拓扑结构的重要工具，并在DNA修补和重组等过程中发挥重要作用。Exonuclease IV是一种具有与Exonuclease III不同作用方向的外切酶。在RPA反应中联合使用Exonuclease III和Exonuclease IV，可以产生协同作用，全面优化RPA产物，实现更快速、更灵敏和更专一的扩增。 

核酸外切酶IV惠诚生物Exonuclease IV

规格参数：

货号：EH04801 

规格：5000U/25000U     

为工业客户提供n*25000U。

质量控制:

纯      度: 经高效液相色谱（SEC-HPLC）和SDS-PAGE检测，纯度大于95%.

使用说明：

长期储存于-80℃，使用后保存于-20℃,避免反复冻融。

核酸外切酶 IV Exonuclease IV催化机制如下:

a. 与DNA双链区结合，内切位点识别切割位点; 

b. 外切位点将3'端的核苷酸和磷酸基团从DNA磷酸主链上切除; 

c. Exonuclease IV沿着DNA链移向5'端，重复步骤b，依序切除核苷酸;

d. 当遇到DNA单链区时，酶失去活性,终止切割。

核酸外切酶 IV Exonuclease IV产品特点：

1. 它包含内切位点和外切位点:

内切位点：与DNA双链区结合,定位切割位点; 

外切位点：负责从DNA磷酸主链上切除3'端的核苷酸和磷酸基团。

2. 双链特异性

Exonuclease IV只可作用于DNA双链区，单链DNA区域不具有活性。这使其适用于研究DNA的二级结构。

3. 依赖性

Exonuclease IV的活性依赖Mg2+，并受到溶液的pH值影响，最适作用pH为8.5。高浓度的NaCl可抑制其活性。

4. 切割效率

在最适条件下，Exonuclease IV的切割速度为每秒60-100个磷酸基团，切割效率较高。

5. 5'磷酸化

Exonuclease IV切割产生3'突出的单链DNA和5'磷酸化的DNA断端。这为其在DNA修补和重组中的应用提供了基础。

核酸外切酶 IV Exonuclease IV Exonuclease IV主要应用包括：

1. DNA末端加工

Exonuclease IV可产生3'突出的单链DNA和5'磷酸化DNA端，这些DNA末端可用于连接、寡核苷酸链接及DNA修补等实验。

2. DNA修补研究

Exonuclease IV切割产生的DNA末端可作为DNA修补反应的底物，用于研究DNA修补机理及相关酶的作用机制。 

3. 重组研究

Exonuclease IV切割产生的DNA末端可用于重组研究，如用于质粒的构建与验证。

4. DNA二级结构分析

比较Exonuclease IV在双链DNA和单链DNA上的切割活性，可以判断DNA区域的二级结构，研究DNA的解旋和复性。

5. DNA拓扑结构分析

Exonuclease IV的切割活性受DNA的拓扑结构影响，可用于研究DNA的超螺旋和球状结构等。

6. DNA蛋白质相互作用

DNA结合蛋白可影响Exonuclease IV的切割活性,利用这一特点可以研究DNA与蛋白质的相互作用机制。

7. 核苷酸切除测定

使用放射性标记的DNA，通过测量Exonuclease IV切割后释放的放射性核苷酸来定量研究影响其活性的因素。

8. DNA损伤检测

DNA损伤会阻碍Exonuclease IV的活性，通过比较不同DNA区域Exonuclease IV的切割效率可以检测DNA损伤的位置和程度。

9. 遗传学研究

Exonuclease IV可用于切割整个基因组DNA，产生特定长度的DNA片段，通过电泳分离和 Southern blot 分析染色体DNA，用于遗传学研究。

核酸外切酶 IV Exonuclease IV Exonuclease IV在RPA技术中作用:

1. 降低非特异性产物

与Exonuclease III相似，Exonuclease IV可以通过降解非特异性扩增产物的5'单链末端来减少其浓度，提高RPA产物的纯度和专一性。

2. 提高检出灵敏度

Exonuclease IV通过降解未结合引物的游离单链DNA来减少反应底物，提高特异性扩增产物的相对浓度，增强RPA的检出灵敏度。

3. 加快反应速度

类似Exonuclease III，Exonuclease IV可以减少底物竞争，使更多的引物和DNA聚合酶结合到特异性扩增区域，加快RPA的反应进程。

4. 改善产物分析

使用Exonuclease IV后可以得到更纯净的特异性RPA产物，便于电泳、测序等手段的检测和分析。

5. 防止引物延伸

某些情况下，RPA的引物可能与非目标区域发生非特异性结合并延伸。Exonuclease IV可以降解这些非特异延伸产物的5'末端，防止引物的过度延伸，提高RPA的专一性。

相关RPA原料：

EH04401 DNA重组酶 Recombinase A

EH03201 Bst DNA聚合酶 Bst DNA polymerase

EH04801 核酸外切酶 IV Exonuclease IV

EH04701 核酸外切酶 III Exonuclease III

EH02501 M-MuLV反转录酶 M-MuLV Reverse Transcriptase

EH03301 Bsu DNA聚合酶大片段 Bsu DNA polymerase, Large Fragment

EH04501 重组肌酸激酶(CK) Creatine Kinase

EH03501 T4 UvsX重组酶 T4 UvsX Recombinase

EH03401 T4噬菌体基因32编码蛋白(gp 32) T4 gene 32 Protein

EH03601 T4 UvsY蛋白 T4 UvsY Protein

HM0058 重组鼠源RNase抑制剂(40 U/µL) RNase Inhibitor