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68次以下是关于人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒的实验使用说明:
BS-1713 人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒 天津本生
一、实验原理
采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),通过HRP标记的检测抗体与样本中AT2R结合,经TMB显色后测定吸光度(OD值),颜色深浅与AT2R浓度呈正相关。
二、试剂盒组成
酶标包被板(48T/96T)
标准品(冻干粉,需用稀释液重构)
检测溶液A/B(HRP标记物)
浓缩洗涤液(需30倍稀释)
显色液A/B(TMB溶液)
终止液。
三、样本处理
血清/血浆:3000rpm离心10-30分钟,避免溶血;
组织匀浆:加入生理盐水捣碎后离心取上清;
保存:分装冻存于-20℃,避免反复冻融。
四、操作步骤
标准品稀释:将冻干标准品用稀释液重构,梯度稀释为7个浓度(如5000pg/mL至78pg/mL);
加样:每孔加入50μL标准品或样本,37℃孵育30分钟;
洗涤:弃液后拍干,加洗涤液静置30秒,重复5次;
显色:加入显色液A/B各50μL,避光反应15分钟;
终止:加入50μL终止液,立即450nm测OD值。
五、注意事项
避免试剂接触金属器械或强氧化剂;
显色时间需严格控制,超过30分钟可能导致背景升高;
浑浊样本需离心澄清后检测;
不同批次试剂组分不可混用。
六、结果计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度。
注:以上资料仅供参考,具体请产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。
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