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大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒实验使用说明书

时间:2025-4-22阅读:32
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  大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒实验使用说明书

  以下是关于大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南:

  BS-3458  大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒

  一、实验原理

  采用双抗体夹心法测定标本中T4水平。通过纯化的大鼠T4抗体包被微孔板形成固相抗体,依次加入样本、HRP标记的T4抗体形成复合物,经TMB显色后测定450nm吸光度(OD值),其颜色深浅与T4浓度呈正相关。

  二、试剂盒组成

  组分 48孔配置 96孔配置 保存条件

  酶标包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃

  标准品(270μg/L) 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃

  酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

  显色剂A/B液 各3ml×1瓶 各6ml×1瓶 2-8℃

  终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

  浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃

  三、样本处理要求

  血清‌:室温静置2小时或4℃过夜后,1000×g离心20分钟取上清,避免反复冻融

  血浆‌:EDTA/肝素抗凝采集,30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟

  组织匀浆‌:PBS冲洗后称重剪碎,按重量体积比1:9加入生理盐水匀浆,2000-3000转/分离心20分钟取上清

  四、操作步骤

  加样‌:标准品/样本加入对应孔,建议做复孔

  孵育‌:37℃温育30分钟

  洗涤‌:甩干孔内液体,每孔加满洗涤液静置30秒后甩干,重复5次

  加酶标试剂‌:每孔50μl,37℃避光孵育30分钟

  显色‌:依次加入显色剂A/B各50μl,37℃避光反应15分钟

  终止‌:每孔加终止液50μl

  检测‌:450nm波长测定OD值(建议5分钟内完成)

  五、结果计算

  以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线

  样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数

  检测范围:0.703-45ng/ml,灵敏度0.422ng/ml

  六、注意事项

  试剂使用前需平衡至室温(20-25℃)

  不同批号试剂不得混用

  浓缩洗涤液出现结晶时需37℃溶解后使用

  有效期6个月,2-8℃保存,避免反复冻融

  七、技术支持

  部分厂商提供免费代测服务及无效退换承诺,具体可咨询供应商。

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