酶联法供研究用艰难梭菌测定试剂盒

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酶联法供研究用艰难梭菌测定试剂盒

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酶联法供研究用艰难梭菌测定试剂盒

 测试原理：

CoproELISA^Tm 值C。艰难梭菌 GDH 是一种用于检测人类粪便中 GDH的酶免疫测定法。

• 分裂的微孔用艰难梭菌 GDH 特异性单克隆抗体包被。
• 将辣根过氧化物酶（HRP）缀合的单克隆抗 GDH 抗体加入到抗体包被的微孔中。
• 将粪便样品稀释在样品稀释剂中并加入微孔中。在该步骤中，艰难梭菌 GDH 由 HRP 缀合的抗体标记并通过包被的抗体固定。
• 通过洗涤除去未结合的缀合物。
• 加入 TMB-底物，底物被过氧化物酶水解，得到还原底物的蓝色溶液。
• 加入终止溶液后，蓝色变为黄色，应由 ELISA 读数器在450 / 620nm 波长下读取。
• 吸光度与艰难梭菌的水平成比例样品中的 GDH。

A. 试剂的制备

• 将所有组件和临床样本进行测试，使其达到室温。确定要

测试的样本总数。除了标本外，每次测试还必须包括以下内容：负控制的一个孔（用于此目的的样品稀释剂）和一个阳性对照孔。

• 通过在密封附近切割一端将微量滴定板从铝袋中取出。在

96 孔框架中留下所需数量的条带（根据待测样品的数量）。

3. 用双去离子水或蒸馏水稀释浓缩洗涤缓冲液 1/20。例如， 为了制备 1 升洗涤缓冲液，将 50ml 浓缩洗涤缓冲液加入950ml 双去离子水或蒸馏水中。

B. 样品处理

• 为每个待测样品设置一个稀释管。

为此，建议使用 1.5 毫升 Eppendorf 管。向每个管中加入200μl 样品稀释剂。标记管。

5. *混合（涡旋）粪便样本以确保充分采样。

• 成型样品：使用木制涂抹棒或一次性茶匙将粪便样品转移

到管中。将约 0.05 至 0.1g 样品（约 3mm 直径）转移至样

品稀释剂。将样品稀释剂中的收集器混合以除去尽可能多 的样品，并将收集器挤压在管的侧面以表达任何残留液体。液体样品：将 50μl 样品转移到管中。确保液体样本均匀悬

浮（涡旋）。

• 将稀释的样品保存在 2˚到 8˚C 之间，直到进行测试。

 中文版说明书由健仑生物技术人员翻译，具体以英文原版为准。

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