适合从植物组织中提取基因组 DNA

 适合从植物组织中提取基因组 DNA

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 适合从植物组织中提取基因组 DNA

采用*的疏水膜技术，*去除植物组织细胞中蛋白和大部分 RNA 等各种干扰物，提取高纯度的DNA。试剂盒采用*的缓冲系统，可从绝大多数不同类型的植物包括水稻，小麦，玉米，拟南芥和大豆等植物中快速提取基因组 DNA。一般情况下，100 mg 新鲜组织的基因组 DNA 产量可达 5-30 μg。

样品处理

2. 组织破碎：可根据不同样品研磨难易程度选择以下方法：1）液氮研磨：将 50-100 mg 组织直接放入研钵，加入少量液氮，迅速研磨，再加少量液氮，再研磨，如此三次，将样品研成粉末。用药匙迅速将样品干粉按 100 mg 组织/1000 μl KBL1 的比例加入一新的 2 ml 离心管中。加入 KBL1 后，震荡混匀。室温 13 000 rpm 离心 2 min。

2）直接研磨：对于新鲜植物组织，将 50-100 mg 组织直接放入研钵，按 100 mg 组织/1000 μlKBL1 比例加入 KBL1，直接在 KBL1 中将样品研磨匀浆后，转入 1.5 ml 离心管（推荐）。室温 13 000 rpm 离心 5 min。弃去沉淀，上清液待转移。

吸附

3. 将上清液转移到平衡过的吸附柱内，室温 13 000 rpm 离心 30 s，使裂解液*流过柱子。弃去收集管中的过滤液，把柱套回收集管中。

注意：1）室温太低可能造成 KBL1 混浊或沉淀，在 37 ℃温浴片刻即可。

2）如上清液体积过大，可以分成数次上柱，每次不要超过 700 μl。

4.（可选）加入 30 μl 浓度为 20-50 μg/ml 的 RNase A 于柱的膜上，37 ℃放置 5-10 min。

注意：本试剂盒没有配备 RNase A 溶液。一般来说，这一步没有必要，因为本试剂盒的纯化柱对 RNA 没有吸附能力。如果实验要求不能残留微量RNA，可采用这一步处理