氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）

氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）

人源性低密度脂蛋白（通过超速离心分离(1.019-1.063g/cc)纯化）在PBS溶液中用5μM Cu2SO4 （氧化剂）37℃ 氧化 20 小时所得。最终通过加入过量EDTA-Na2终止氧化反应。通过琼脂糖凝胶电泳对不同的LDL的迁移率进行分析。氧化型LDL的迁移速度是普通LDL的2倍。这种氧化型的LDL被广泛用于研究类脂化合物代谢作用，但细胞凋亡诱导实验除外。细胞凋亡诱导可选本公司所产高氧化程度低密度脂蛋白进行实验。

氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）

浓度: 2.0mg/ml（蛋白质）

包装： 经膜过滤后在PH为7.4，含有1μM EDTA-Na2的PBS溶液中无菌保存；

来源： 铜离子氧化人源血浆LDL；

稀释方式：PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养液；

注意事项：长时间的储存后可能会产生沉淀，这种现象属于正常情况。将溶液放入离心管中离心2分钟将聚合物除去即可。氧化型LDL不稳定，实验时最hao现用现配，采用新鲜配置工作液。

慢病毒感染快速指南

1. 将目的细胞按 30%汇合度接种到 24 孔板，约 3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为 5×104为例，加入 500uL wan全培养基进行细胞培养。

2. 接种后 12-20h 感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。

3.加病毒量计算方法：（细胞数×MOI 值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。同时加入 Polybrene，每孔加 0.25uL，浓度为 10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为5ug/mL。

4.感染 16-20h 后更换培养基，弃去培养基，每孔加入 500uL 新鲜的培养基。

5.感染后 48-96h 显微镜观察荧光。（注：如果 48h-96h 期间细胞汇合度达到 100%，请及时传代培养）。

6.建议将 48 孔板细胞进行传代，传代 12 孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳 MOI 值。一般选择细胞生长良好，感染效率 80%左右的感染条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不一定为细胞最佳 MOI 值，因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞状态。