详细介绍
反应原理:
6-FAM-OtBu 是一种荧光染料的保护形式,其中 6-FAM(6-Carboxyfluorescein)是一种常用的绿色荧光染料,而 OtBu(叔丁氧基,tert-Butyl ester)是一个保护基团,用于保护6-FAM的羧基(-COOH)。
高荧光强度:6-FAM 具有较高的荧光强度和良好的光稳定性。
保护基团:叔丁氧基(OtBu)可以保护羧基,防止其在化学反应中被氧化或参与不必要的反应。
多功能性:适用于多种生物分子的标记和成像应用。
6-FAM-OtBu 是一种荧光标记试剂,结合了6-FAM的高荧光强度和叔丁氧基的保护功能,广泛应用于生物分子标记、细胞成像和流式细胞术等领域。
包装:
基础知识概述:
1845691-47-5,6-fam-OtBu
英文名:6-fam-OtBu
中文名:6-羧基荧光素叔丁酯
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
化学结构:
6-FAM:6-Carboxyfluorescein 是一种绿色荧光染料,具有良好的光稳定性和较高的荧光强度。其荧光发射波长约为520 nm,适合用于荧光显微镜成像和流式细胞术。
OtBu:叔丁氧基(tert-Butyl ester)是一个保护基团,通常用于保护羧基(-COOH),防止其在化学反应中被氧化或参与不必要的反应。
相关应用:
1. 荧光标记
生物分子标记:6-FAM-OtBu 可用于标记蛋白质、肽、寡核苷酸等生物分子。通过化学反应将6-FAM共轭到生物分子上,可以实现荧光标记。
细胞成像:标记后的生物分子可用于荧光显微镜成像,观察细胞内的分子分布和动态变化。
流式细胞术:可用于流式细胞术分析,检测细胞表面或细胞内的生物分子表达水平。
2. 生物化学研究
荧光探针:6-FAM-OtBu 可用于开发荧光探针,用于研究生物分子的相互作用和动力学过程。
荧光共振能量转移(FRET):6-FAM 可以作为FRET中的供体染料,与合适的受体染料(如Cy5)配对,用于研究分子间的相互作用。
合成与标记方法:
1. 合成方法
保护羧基:通过化学反应将6-FAM的羧基(-COOH)转化为叔丁氧基酯(-COOtBu),形成6-FAM-OtBu。
脱保护:在需要使用羧基时,可以通过酸性条件将叔丁氧基酯水解为羧基。
2. 标记方法
共轭反应:将6-FAM-OtBu与生物分子上的氨基(-NH₂)或巯基(-SH)反应,形成稳定的共价键。通常需要使用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯或马来酰亚胺(Maleimide)作为活性中间体。
优化条件:反应条件(如pH、温度、反应时间)需要根据具体应用进行优化。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关试剂(部分):
6-fam NHS Ester
6-fam-NHS
6-fam-DBCO
5-fam alkyne
fam alkyne,5-isomer
6-fam-tetrazine
6-fam-PEG2-NH2
5-fam Cysteamine
fam-Semaglutide
fam-dT phosphoramidite
6-fam-Phosphoramidite
Alkyne-Val-Cit-PAB-fam
5-fam NHS
5-fam NH2
fam phosphoramidite, 6-isomer
1845691-47-5,6-fam-OtBu