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人软骨细胞

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:288

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 软骨组织
人软骨细胞的相关产品:猪骨骼肌细胞原代细胞5×105猪皮肤成纤维细胞原代细胞5×105猪骨髓间充质干细胞原代细胞5×105猪脂肪干细胞原代细胞5×105猪B淋巴细胞原代细胞1×106

详细介绍

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

人软骨细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

软骨组织

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自软骨组织;软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。软骨组织再生能力强,这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞,以后逐渐变为软骨母细胞,并形成软骨基质,细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同,可将软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种,其中以透明软骨的分布较广,结构也较典型。软骨细胞(chondrocyte)位于软骨陷窝内。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层,单个分布,体积较小,呈椭圆形,长轴与软骨表面平行,越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

5.方法简介:

实验室分离的采用胶原 - 中性dan白联合消化制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  梭形、多角形

传代特性  可传5代左右;3代以内状态佳

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

1.png

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Cappuccino蛋白抗体 肾母细胞瘤X蛋白封闭多肽 

ADP核糖水解PARG抗体 检查点蛋白HUS1B封闭多肽 

富含半胱氨运动神经元蛋白1抗体 锌指蛋白90封闭多肽 

驱动蛋白轻链3抗体 Artemin封闭多肽 

5抗体 锌指蛋白117封闭多肽 

磷二酯6β抗体 CD6封闭多肽 

鸟氨氨基转移抗体 FC段IgE受体α多肽/Fc ε RIα封闭多肽 

间隙连接蛋白31抗体 胰岛样生长因子结合蛋白6封闭多肽 

NK细胞受体2D(CD314)抗体 FAM129B蛋白封闭多肽 

赖氨羟化2抗体 多聚腺苷因子Clp1蛋白封闭多肽 

细胞骨架结合蛋白2抗体 因子蛋白 

神经性舞蹈病蛋白抗体 肿瘤坏死因子C/淋巴毒β封闭多肽 

胰岛受体α抗体 锌指蛋白18封闭多肽 

单核细胞趋化蛋白1抗体 磷化微管相关蛋白2封闭多肽 

过量位点蛋白5抗体 丝裂原活化蛋白激组织蛋白1封闭多肽 

COPT2抗体 紧密连接蛋白2封闭多肽 

Cy3标记小鼠抗人CD22单克隆抗体 蛋白质精氨亚型1封闭多肽 

干扰-gamma受体1抗体 19号染色体开放阅读框64/C19orf64封闭多肽 
人软骨细胞EL-4-B5细胞专用培养基125mL×4EL-4-B5细胞专用培养由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持EL-4-B5细胞佳的生长状态。本产品中已包含EL-4-B5细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于EL-4-B5细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。

小鼠骨内膜间充质干细胞培养基100mL小鼠骨内膜间充质干细胞培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持小鼠骨内膜间充质干细胞佳的生长状态。本产品中已包含小鼠骨内膜间充质干细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于小鼠骨内膜间充质干细胞的体外培养。

MEM无糖(不含L-)500mL-

小鼠牙龈上皮细胞培养基100mL小鼠牙龈上皮细胞培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持小鼠牙龈上皮细胞佳的生长状态。本产品中已包含小鼠牙龈上皮细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于小鼠牙龈上皮细胞的体外培养。

DMEM/F12(含HEPES、双抗)500mL-

M-22细胞专用培养基125mL×4M-22细胞专用培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持M-22细胞佳的生长状态。本产品中已包含M-22细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于M-22细胞的体外培养。

NCI-H2170细胞专用培养基125mL×4NCI-H2170细胞专用培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持NCI-H2170细胞佳的生长状态。本产品中已包含NCI-H2170细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于NCI-H2170细胞的体外培养。

 


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