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大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:284

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 骨髓
大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)的相关产品:山羊乳腺上皮细胞永生化细胞专用培养基细胞培养基500ML猪骨骼肌卫星细胞永生化细胞专用培养基细胞培养基100ML猪骨骼肌卫星细胞永生化细胞专用培养基细胞培养基500ML人肝窦内皮细胞永生化细胞专用培养基细胞培养基100ML人肝窦内皮细胞永生化细胞专用培养基细胞培养基500ML

详细介绍

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)

5×105cells/T25细胞培养瓶

骨髓

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的;树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。

5.方法简介:

实验室分离的采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经CD86免疫荧光鉴定、细胞形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  半贴半悬浮

细胞形态  圆形,树突状

传代特性  属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

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实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

PSTK蛋白抗体 微管相关丝氨/苏氨激3封闭多肽 人衔接活化因子1(APAF1) ELISA试剂盒

肌微管相关蛋白10抗体 DUS2L蛋白封闭多肽 人锚蛋白B(Ank-B)试剂盒 ELISA

果糖-2,6-二磷3/磷果糖激2抗体 血红蛋白γ2封闭多肽 人潜伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA检测试剂盒

卷曲螺旋结构域蛋白92抗体 线粒体核糖体蛋白L42封闭多肽 人重组激活基因2(RAG-2) ELISA Kit

细胞角蛋白31抗体 活化受体4封闭多肽 人重组激活基因1(RAG-1)ELISA试剂盒

玻璃粘连蛋白抗体 磷化脂肪细胞型脂肪结合蛋白 人NOD样受体(NLR)试剂盒 ELISA

PARD6G蛋白抗体 核糖体蛋白S8封闭多肽 人视黄诱导基因/RIG-1样受体(RLR) ELISA检测试剂盒

FAM59B蛋白抗体 低密度脂蛋白受体的诱导降解蛋白封闭多肽 人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA Kit

英文名称: Caspase-3 单核细胞趋化蛋白2封闭多肽(小鼠) 人杀菌肽B(CecB) ELISA试剂盒

突触结合蛋白样蛋白4抗体 伸长因子结合蛋白封闭多肽 人抗菌肽(Att) 试剂盒 ELISA

轴丝动力蛋白重链9抗体 泛激活E1封闭多肽 人颗粒溶(GNLY) ELISA检测试剂盒

水通道蛋白-7抗体 附睾特异蛋白15封闭多肽 人富组蛋白(HTN5)ELISA Kit

钙介质抗体 果糖-2,6-二磷3/磷果糖激2封闭多肽 样转录体受体(ILTsR/LIR/CD85)ELISA试剂盒

体激活因子PA28γ抗体 磷化丝裂原活化蛋白激激8封闭多肽 人丝狀血球凝集(FHA)试剂盒 ELISA

离子型谷氨受体1抗体 磷化孕激受体封闭多肽 人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)ELISA检测试剂盒

心血管发育中胚层相关蛋白1抗体 嗅觉受体52J3封闭多肽 人嗜环蛋白/亲环A(CyPA)ELISA Kit

酰基转移2抗体 CD30封闭多肽 人肌养蛋白(dystrophin)ELISA试剂盒

双重特异性磷27抗体 锌指蛋白313封闭多肽 人胶原凝集(Collectin)试剂盒 ELISA
大鼠骨髓树突状细胞(成熟DC细胞)小鼠肾足细胞英文名称:小鼠肾足细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

小鼠输尿管上皮细胞英文名称:小鼠输尿管上皮细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

小鼠输尿管平滑肌细胞英文名称:小鼠输尿管平滑肌细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

小鼠膀胱上皮细胞英文名称:小鼠膀胱上皮细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

小鼠膀胱平滑肌细胞英文名称:小鼠膀胱平滑肌细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

小鼠膀胱基质成纤维细胞英文名称:小鼠膀胱基质成纤维细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

小鼠前列腺上皮细胞英文名称:小鼠前列腺上皮细胞5×105提供免疫荧光鉴定报告

 


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