甲基化组蛋白H3(monomethylK9)单克隆抗体

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英文名称：Histone H3 (mono methyl K9)

英文别名:HistoneH3(monomethylLys9);H3K9me1;H3histonefamilymemberEpseudogene;H3histonefamily,memberA;H3/A;H31_HUMAN;H3F3;H3FA;Hist1h3a;HIST1H3B;HIST1H3C;HIST1H3D;HIST1H3E;HIST1H3F;HIST1H3G;HIST1H3H;HIST1H3I;HIST1H3J;HIST3H3;histone1,H3a;Histonecluster1,H3a;HistoneH33pseudogene;HistoneH3.1;HistoneH3/a;HistoneH3/b;HistoneH3/c;HistoneH3/d;HistoneH3/f;HistoneH3/h;HistoneH3/i;HistoneH3/j;HistoneH3/k;HistoneH3/l;H3.1;H3/d;H3C1;H3C10;H3C11;H3C12;H3C2;H3C3;H3C4;H3C7;H3C8;H3FD;

交叉反应:Human, Mouse, Rat, Cow

标记:Unconjugated

抗体来源:Mouse

抗体类型:Monoclonal

克隆号:3F8

免疫原:KLHconjugatedsynthesisedmethylpeptidederivedfromhumanHistoneH3aroundthemethylationsiteofmonomethylK9

蛋白细胞定位:细胞核

纯化方法:AffinitypurifiedbyProteinG

亚型:IgG1

性状:Liquid

浓度:1mg/ml

储存液:0.01MTBS(pH7.4)with1%BSA,0.03%Proclin300and50%Glycerol.

保存条件:Shippedat4℃.Storeat-20°Cforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.

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免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

抗体的制备过程：

1. 免疫原的制备

普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫动物

常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。

4. 免疫血清的纯化与鉴定

得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免疫血清的保存

建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

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