详细介绍
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Hoechst33258 Staining Solution(1mg/ml) | 1ml|5×1ml | 1~3天 |
商品介绍:
用途: 细胞凋亡检测、普通细胞核染色、常规的DNA染色。 注意事项: Hoechst33258染色中leagene公司推荐采用该试剂。Hoechst33258是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 |
储存条件:-20℃,避光,12个月
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
没药(胶质没药)(标准品)英文名称: Indole高尔基体外周膜蛋白1抗体包装50mg
没药(天然没药)(标准品)英文名称: Ethyl octanoate高尔基体膜蛋白抗体包装100mg
玫瑰花(标准品)英文名称: 2-Ethyl-1-hexanol高尔基体磷蛋白6抗体包装100mg
玫瑰花总黄英文名称: Ethyl palmitate高尔基SNAP受体复合物1抗体包装25g
蒙花苷(标准品)英文名称: 2-Ethylhexanoic acid谷草酰乙转1样蛋白1抗体包装5g
迷迭香(标准品)英文名称: p-AnisaldehydeG蛋白偶联受体52抗体包装1g
密蒙花(标准品)英文名称: Bis(2-ethylhexyl)adipate核膜糖蛋白210抗体包装5g
蜜环菌粉(标准品)英文名称: Disperse Blue 35GADD153抗体包装1g
绵萆薢(标准品)英文名称: 9-MethylanthraceneG蛋白偶联受体57抗体包装10MG
绵大戟(标准品)英文名称: MCPAGSK-3结合蛋白FRAT2抗体包装1g
绵马贯众(标准品)英文名称: Methyl oleate磷化内收蛋白gamma抗体包装250mg
绵马贯众ABBA(标准品)英文名称: Isoeugenol生长因子受体结合适应蛋白抗体包装100g
绵马ABA(标准品)英文名称: NonaneGARNL3蛋白抗体包装25g
棉花根(标准品)英文名称: 1-NaphtholTuberin样蛋白1抗体包装5g
棉子糖(标准品)英文名称: N-NitrosodiethylamineX连锁Charcot-Marie-Tooth变相关蛋白抗体包装1g
炭疽芽孢杆菌Bacillus│anthracis 质量规格:>99%,BR苹果脱氢1试剂盒络塞琳;Rosarin
北方梭囊孔菌Climacocystis│borealis 质量规格:HPLC>98%,标准品平滑肌肌动蛋白试剂盒毛两面针;toddalolactone
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格:>98%,BR嘌呤核苷磷化试剂盒磷川芎;Tetramethylpyr
Hoechst33258染色液(1mg/ml)维生B5
其他D-泛钙;本多生钙;(R)-N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-钙;N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰)-β-基钙;右旋泛钙
英文名称:VB5
其他英文名称:D-calcium pantothenate;Vitamin B5;Pantothenic acid calcium salt;D-(+)-Pantothenic acid calcium
产品规格:BR,99%
包装:25克/100克/250克
CAS号:137-08-6
C18H32CaN2O10=476.54
级别:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+25.5~+27.5°
PH:2.4~3.0
氮含量:16.9~17.6%
溶液色泽:≤Y7
干燥失重:≤0.5%
性状:粉末。无气味,味微咸苦。遇光渐变质,在空气中稳定。1g溶于约4.5ml水、90ml乙,微溶于,不溶于。10%水溶液pH3.2。性水溶液稳定,即便在加热至120℃(分解并升华)。大吸收波长(0.1mol/L盐)290nm(ε840)、(磷盐缓冲,pH7)253、325nm(ε3700、7100)。低毒,半数致死量(大鼠,经口)4000mg/kg。
用途:生化研究。
保存:RT,避光