NUP50人50kDa核孔蛋白ELISA试剂盒

NUP50人50kDa核孔蛋白ELISA试剂盒公司正在销售的产品：芳烃受体抑制因子ELISA试剂盒 AHRRHuman Aryl Hydrocarbon Receptor Repressor(AHRR)ELISA Kit芳犬尿氨suan甲酰胺酶ELISA试剂盒 AFMIDHuman Arylformamidase(AFMID)ELISA Kit芳基硫suan酯酶KELISA试剂盒 ARSKHuma

ELISA试剂盒优点：

1、抗体----高效、灵敏、特异

2、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高

3、良好的优化方案----重复性高，可靠性强

4、购买本公司的ELISA试剂盒，免费代测

5、技术服务要求：专业，规范，高效

6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本

7、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等

8、可检测指标齐全：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等

9、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，良好的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴。

服务：

我们可以根据您的应用需要，比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求，而量身定制检测试剂盒，有效控制检测试剂成本。公司产品仅用于科研并可提供免费代测。

产品名称：NUP50人50kDa核孔蛋白ELISA试剂盒
英文名称：Human Nucleoporin 50kDa(NUP50)ELISA Kit
货号：A104649
产品规格：96T/48T。

主要成分：酶标板,试剂,标准品等

性状：盒装液体

试剂盒保存：2-8℃低温保存。

标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

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注意事项：

1加样：

①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；

②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；

③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。

2.温育：

①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；

②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；

③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应"，因此尽量采用水浴；

3.洗板：

①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；

②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；

③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；

4.显色：

ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。

5.判定：

读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。

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标本的采集与保存：

1、血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜，然后1000×g 离心20 分钟，取上清即

可，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。

2、血浆：用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟，

取上清即可检测，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。

3、组织匀浆：

1） 取适量组织块，于预冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，称重后备用（组织块较大需先剪碎后再匀浆）；

2） 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨，该过程需在冰上进行（有条件实验室可选用机器匀浆）；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理（超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2 次）。

3） 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟，留取上清即可检测。

4、其它生物标本：请1000×g 离心20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20oC 或-80oC 保存，但应避免反复冻融。

产品属性：

公司产品仅用于科研组成及试剂配制 :

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

ELISA试剂盒的组成:

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ELISA技术的*性：

（一）灵敏度高

虽然酶活性调节ELISA方法的灵敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大ELISA中，检测的灵敏度远比RIA高。根据质量作用定律。即免疫反应所形成的免疫复合物量与反应物浓度成正比。推测所检测的待测物分子数为1。已知1个摩尔浓度含6.02×1023个分子，那么理论推测酶活性放大Elisa方法的zui低检测限可达1.7×10-24mol/L。虽然在实际应用中由于反应条件和试剂纯度以及仪器精度等因素的影响，往往达不到这个水平（大于104个分子），但表明Elisa在灵敏度方面的改进潜力是很大的。

（二）特异性强

从免疫反应的角度来说，Elisa与RIA的特异性应该是。但在ELISA方法中，由于作用检测指示剂的酶与其底物的反应有专一性，从而增加了该方法的特异性。

（三）对仪器设备要求不高，测定成本低

Elisa测定在普通实验室便可进行，常用的仪器设备包括加样器、培养箱、酶标专用读数器等。按现有价格折算，酶标仪的价格只及液闪仪的1/6至1/4，因此每测定一个样本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法，还可在野外进行，操作十分方便。

（四）方法快速、简便

均质酶免疫测定方法操作时，所有反应试剂均在同一体系内进行，不需任何分离步骤，操作十分简便、快速，数分钟便能得出结果。某些定性Elisa试剂盒，如国外生产的某些奶牛发情鉴定和妊娠诊断Elisa试剂盒，数分钟时间便能完成一次测定。

（五）试剂保存时间较长

作为检测指示剂用的酶和酶标记物，在低温或干燥条件下相对稳定，可保存半年至数年之久。

（六）自动化程度高

Elisa由于不存在放射性同位素污染，因此，除加待测样本需要人工操作外，其他各步骤均可用仪器自动化完成。在这种自动化条件下，平均每人每天可完成2000余个样本的检测工作。

（七）方法种类多

ELISA技术可以充分利用单克隆抗体的优点，并能利用某些非免疫反应试剂（如SPA、凝集素等）的作用，发展成为许多新方法。此外，发展Elisa技术还可以从酶及其底物两方面着手。这是因为用于ELISA技术的酶其种类远远多于可用作RIA检测指示剂的放射性同位素。生物界的酶多种多样，有希望开发很多类型的酶用于Elisa，并建立相应的ELISA方法。相反，自然界的化学元素是有限的，放射性同位素的种类更加有限。第二，由于酶的多样性，酶作用底物也有多种多样，与此相对应的生色源或供氢体的种类也有远大的开发和发展潜力。
操作步骤：

1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，

3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同 3。

8.洗涤：操作同 5。

9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.

10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

Recombina Human RRM2宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human DRD1宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human WRN宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human TIMM44宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human KI67宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human APT-2宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human IL-1RA宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Mouse IL-1 alpha宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Mouse

Recombina Human TMEM176B宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombina Human TFAP4宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
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