详细介绍
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Cell Apoptosis Detection Kit(PI) | 100T | 1~3天 |
商品介绍:
荧光标记是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来,从而区别鉴别出正常细胞、凋亡细胞、坏死细胞以及不同凋亡时期或细胞周期。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA 结合性染料,其激发和发射波长分别为536nm 和617nm,产生红色荧光,但无膜通透性,不能透过活细胞膜,只能染死细胞。 |
在荧光显微镜下观察,正常细胞不能着色,早期凋亡细胞呈微弱红光,晚期凋亡细胞红光加强,坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时,凋亡细胞因内源性核酸酶被激活,使DNA 广泛降解、断裂,DNA 结构发生剧变,随着凋亡的进程,DNA 断裂产生的小分子量DNA 溢出胞外,细胞总DNA 量降低,于正常G0/G1 细胞群前出现一DNA 低染细胞群,即G1 峰前出现亚二倍体峰(sub-G1)或称A0 细胞群,即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI 直接对细胞DNA 染色后,进行流式细胞仪分析,即可检测到凋亡细胞DNA的变化。
储存:2-8℃,避光,有效期一年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
大叶紫珠(标准品)英文名称: Bromophenol red, sodium saltFAM153B蛋白抗体包装5g
大枣(标准品)英文名称: Butyl stearateFAM46C蛋白抗体包装25ml
大皂角(标准品)英文名称: C10E6舌癌耐药相关蛋白1包装1g
玳瑁(标准品)英文名称: C12E10FAM129B蛋白抗体包装5g
丹参(标准品)英文名称: C12E9微管动力调节蛋白2抗体包装1g
丹参(标准品)英文名称: Calcium chloride, anhydrousFAM50A蛋白抗体包装5g
丹参钠(标准品)英文名称: Calcium oxalate, monohydrateFAM113A蛋白抗体包装5mg
丹参IIA(标准品)英文名称: Calcium oxide (Lime) powderFAM150A蛋白抗体包装25ml
丹参IIA-磺钠(标准品)英文名称: Calcium oxide lumpFRMD8蛋白抗体包装5ml
丹参I(标准品)英文名称: Calcium phosphate, monobasic, monohydrateFGFR1癌基因伴侣蛋白抗体包装1g
丹酚A(标准品)英文名称: Calcium pyrophosphateFAM家族蛋白40A抗体包装5g
丹酚B(标准品)英文名称: Canada balsamFAM55D蛋白抗体包装1g
丹酚B二酯英文名称: Caprolactam组织激活过氧化活化增生受体γ蛋白抗体包装25g
丹酚C(标准品)英文名称: Carboxypeptidase YFAM21C蛋白抗体包装5g
丹酚D(标准品)英文名称: Castor oilFAM13C1蛋白抗体包装1g
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BR神经粘附分子配体1试剂盒去氢吴茱萸碱;Dehydroevodia
猪霍乱沙门氏菌Salmonella│choleraesuis 质量规格:BR神经特异性烯化试剂盒去泽拉木 ;Demethylzeyl
季氏毕赤酵母Pichia│guilliermondii 质量规格:>98%,进口分装神经肽Nesfatin-1 elisa试剂盒13-去羟基印乌碱 ; 13-Dehyd
碘化丙啶PI染色试剂盒伍德合金
其他 铋铅锡镉合金;伍氏金;武德金
英文名称: Wood’s metal
其他英文名称: Wood’s metal fusible
产品规格: AR
包装:500克
CAS号:76093-98-6
级别:AR
结晶点:70.0~72.0℃
性状:灰粒状固体。有光泽金属。由铋50%、铅26.7%、锡13.3%、镉 10%所组成的低熔点合金。熔点 70℃。
用途:生化研究。洒水喷洒系统。阀装置
保存:RT