详细介绍
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
250ml×3 | 1~3天 |
商品介绍:
瑞氏染液主要应用于血液和骨髓涂片染色。 |
操作步骤
1. (选做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室温固定15-30 分钟。
2. 吸去固定液,室温通风晾干。
3. 将试剂一滴加到载玻片上,均匀覆盖住载片上血细胞,染色时间约为1 分钟。等染液有变红的趋势时,迅速滴加两倍试剂一的量的试剂二。继续染色5 到8 分钟。
4. 小股水流洗片,防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。30s 水洗结束后将载片放到阴凉处风干。
5. 显微镜镜检。
染色结果
1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
注意事项
1. 推片:取全血3 微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面向前滑动,至血液铺完血膜为止。
2. 涂片时不要太厚也不要太薄,太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。
3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。
4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400 微升,试剂二是试剂一的1 倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。
5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1-3 分钟,直至红润为止。
6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3-5 秒。
储存:2~8℃,避光,有效期12个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
伊维菌(标准品)英文名称: Aucubin微管相关蛋白EB家族3抗体包装25g
依达拉奉(标准品)英文名称: Metronidazole真核翻译起始因子5抗体包装5g
依法韦仑(标准品)英文名称: Metronidazole遗传性前列腺癌蛋白2抗体包装25g
依那普利拉(标准品)英文名称: 8-O-Acetylharpagide磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装5g
依那普利双(标准品)英文名称: Chrysoobtusin磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装25ml
依诺肝钠(标准品)英文名称: Myristicin磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装5ml
依诺沙星(标准品)英文名称: Kakuol染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体包装100mg
依帕司他(标准品)英文名称: L-Asarinin上皮微管相关蛋白7抗体包装1g
依普利(标准品)英文名称: Gitogenin碱性鞘磷脂7抗体包装100g
依替膦二钠(标准品)英文名称: Isoliquiritigenin表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体包装25g
依替米星(标准品)英文名称: Isoliquiritigenin长链脂肪延长长ELOVL6抗体包装100g
*度(标准品)英文名称: Ginsenoside Re酪蛋白激受体A6抗体包装25g
*度(标准品)英文名称: Ginsenoside F4酪蛋白激受体A3抗体包装5g
*红霉(标准品)英文名称: Ginsenoside RK3酪蛋白激受体A7抗体包装1g
*(标准品)英文名称: Ginsenoside RH4酪蛋白激受体B1抗体包装5g
腐皮镰孢Fusarium│solani 质量规格:>95%,BR糖缺失性转铁蛋白试剂盒2,3,5,4’-四羟基二乙烯-2-O
: ATCC27562=DSM10143=NBRC15645=JCM3725=BCRC12905=CCRC12905=CECT529=CCUG13448资源名称: 创伤弧菌 质量规格:HPLC>95%,标准品糖皮质激受体β试剂盒石吊兰;Lysionotin
短芽孢杆菌Bacillus│pumilus 质量规格:>900μg//mg,USP,BR糖皮质激受体α试剂盒射干苷元;tectorigenin
快速瑞氏染液辛基琼脂糖凝胶4FF
英文名称:Octyl Sepharose 4FF
产品规格:国产
包装:25毫升/100毫升
产品规格:进分
包装:25毫升/100毫升
CAS号:68652-09-5
级别:BR
凝胶类型:疏水层析介质
粒 径: 45-165µm
工作PH值:3-13
操作温度:4-40℃
配基偶联量:5µmol octyl/ml 介质
Matrix:Highly cross linked agarose 4%
Type of ligand:Octyl:R-O-CH2-CH(OH)-CH2-O-(CH2)7-CH3
Bead form:R igid,spherical,macro porous
Mean particle size:90um diameter
Particle size distribution:45~165um
Degree of substitution:approx 5 umol octy/ml medium
PH stability:working range 3-13 and cleaning range 2-14
Autoclavable:20 min at 121℃
Linear flow rate at 25℃:≥150cm/h at 100kPa(1 bar, 14.5 psi);XK50/60,25cm bed height
Chemical stability:Stable in all commonly used aqueous buffers-1mM HCL;1M NaOH;(40℃,7 days) 30% isopropanol;70% ethanol; 6 M guanidine-hydrochloride;30% acetonitrile
性状:含20%乙,底部为乳白色胶体。
用途:生化研究。疏水性中等,适合各种蛋白的分离和纯化
保存:2~8℃