详细介绍
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
500μL | 1~3天 |
商品介绍:
SYTOX 绿色死细胞核酸染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一种可轻易穿过受损细胞质膜而不能透过活细胞质膜的绿色核酸染料,其在于核酸结合之后荧光强度会得到超过500 倍的显著增强。SYTOX 绿色死细胞核酸染料可以用于染死的真核细胞的RNA和DNA,在革兰氏细菌中同样也适用。使用者可以利用氩激光激发器的488nm(或者其他任何带有450-490nm 激发光源的激发器)激发染料。 |
SYTOX 绿色死细胞核酸染料可用于多色荧光分析,在不同的实验应用中染固定细胞的核酸,如,荧光显微镜、荧光酶标仪,流式细胞仪上。
储存:-20℃,避光,有效期6个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
扁蓄苷(标准品)英文名称: Iohexol口蹄疫病A型抗体(N端)包装25g
表白桦脂(标准品)英文名称: Maltose Phosphorylase 5U/mg肾刷状缘抗体包装500g
表儿茶(标准品)英文名称: MetribuzinFLAG Tag标签抗体(N端)包装5g
表儿茶没食子酯(标准品)英文名称: MU-alpha-GALFAM166A蛋白抗体包装100g
表告依春(标准品)英文名称: Mucic acid脂肪合成抗体包装25g
表戈米辛O(标准品)英文名称: Naphthol AS-MX phosphate脑型脂肪结合蛋白抗体(C端)包装5g
表没食子儿茶(标准品)英文名称: Potassium oxalate, monohydrate磷化纤维束蛋白同源物1抗体包装1g
表没食子儿茶没食子酯(标准品)英文名称: Sodium bitartrate, monohydrate粘着斑激抗体包装5g
表木栓(标准品)英文名称: Sodium sulfate, decahydrate凝血因子5抗体包装100mg
表小檗碱(标准品)英文名称: Span* 40成纤维生长因子10抗体包装1g
别隐品碱;A-别隐品碱(标准品)英文名称: Tyramine hydrochlorideXIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体包装250mg
滨蒿內酯(标准品)英文名称: 2-Furoic acid羊抗人纤维蛋白原抗体包装1g
槟榔(标准品)英文名称: 2-MethylimidazoleFas活化激结构域蛋白5抗体包装250mg
槟榔花(标准品)英文名称: 6-ChloropurineF-box蛋白38抗体包装100g
波棱瓜子(标准品)英文名称: Big CHAPFK506结合蛋白38抗体包装25g
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品嗜伊红颗粒主要碱性蛋白试剂盒七叶皂苷 IIa;Escin IIa
暗灰链霉菌Streptomyces│canus 质量规格:>99%,BR嗜性粒阳离子蛋白试剂盒七叶皂苷 Ib;Escin Ib
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:HPLC>99%,标准品嗜粒趋化蛋白Eotaxin 2试剂盒七叶皂苷 Ia;Escin Ia
死细胞核酸染料-绿菁SYTOX芴甲氧羰基-S-乙酰甲基-L-半胱
其他Na-芴甲氧羰酰基-S-(乙酰基-甲基)-L-半胱;FMOC-S-乙酰甲基-L-半胱
英文名称:Nα-Fmoc-S-acetaminomethyl-L-cysteine
其他英文名称:Fmoc-Cys(Acm)-OH
产品规格:特纯,98%
包装:5克/25克/100克
CAS号:86060-81-3
C21H22N2O5S=414.47
级别:Purum
含量:≥98.0%
熔点:145~150℃
性状:粉末
用途:生化研究
保存:2~8℃