详细介绍
中文名称:活细胞核染料吖啶橙
英文名称:Acridine Orange;AO
产品规格:25mg
发货周期:1~3天
橙是一种荧光色素,其检测激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。它与细胞中DNA 和RNA 结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光,与DNA 结合量少发绿色荧光,与RNA 结合量多发桔黄色或桔红色荧光。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA 和RNA 染色。 |
在荧光显微镜下观察,橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。橙AO 常与溴化乙啶EB 合用双染,因EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
用于细胞核染色时,推荐的橙工作浓度为0.1%。一般孵育条件是室温避光15 分钟。由于不同细胞对橙的摄取能力不同,该法不一定适用所有细胞。
储存:-20℃,避光,有效期12月。
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
百合(标准品)英文名称: Lithium citrate, tetrahydrate红膜蛋白4.2抗体包装100g
百两金A(标准品)英文名称: MU-Gal转录因子ELYS蛋白抗体包装25g
百秋李(标准品)英文名称: MU-GLU内皮粘蛋白EMCN抗体包装500g
百蕊草(标准品)英文名称: MUP, disodium salt, trihydrate环磷腺苷调节鸟嘌呤核苷交换因子1抗体包装25g
百蕊草I/山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷/阿福豆苷(标准...英文名称: POPOP磷化转录因子E2F1抗体包装5g
柏子仁(标准品)英文名称: PPO上皮特异性转录因子1抗体包装100g
败酱草(标准品)英文名称: Sodium glycolate内皮2抗体包装25g
斑蝥(标准品)英文名称: Span* 60内皮受体蛋白酪激B3抗体包装1g
板蓝根(标准品)英文名称: Titanium (IV) oxide软骨外胚层发育不良相关蛋白抗体包装250mg
半边莲(标准品)英文名称: Triton X-405髓鞘蛋白P0样蛋白2抗体包装5g
半甘草异黄B英文名称: Urinary trypsin inhibitor fragment雌激受体α抗体包装25MG
半夏(标准品)英文名称: Zinc oxide内质网核信号转导蛋白2抗体包装1g
半枝莲(标准品)英文名称: 4(5)-Methylimidazole锌指蛋白521抗体包装250mg
宝藿苷I,羊藿次苷II(标准品)英文名称: Aluminum hydroxide大肠杆菌埃希杆菌O6抗体(肠致病性大肠杆菌O6)包装5g
宝藿苷II;大花羊藿苷A;意卡瑞苷A(标准品)英文名称: Ammonium phosphate, tribasic , trihydrate植物延展-β包装100mg
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:总含量>95% ,进分痘带状疱疹病IgG试剂盒瑞香;7,8-Dihydroxycou
荧光假单胞菌Pseudomonas│fluorescens 质量规格:>98%;NK1受体拮抗剂双氢睾试剂盒肉桂;Cinnamyl alcohol
围小从壳Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 质量规格:>98%,BR衰变加速因子试剂盒肉桂;Cinnamaldehyde
活细胞核染料吖啶橙芴甲氧羰酰氯
其他氯甲-9-芴基甲酯;9-芴甲氧羰酰氯;氯甲-9-芴甲酯;9-氯甲芴甲酯;9-芴甲基氯甲酯;9-芴亚甲氧基甲酰氯
英文名称:FMOC-C1
其他英文名称:Chloroformic acid 9-fluorenylmethyl ester;9-Fluorenylmethyl chloroformate
产品规格:BR,99%
包装:50克/250克/1公斤
CAS号:28920-43-6
C15H11ClO2=258.70
级别:BR
含量:≥98.0%
熔点:63-64°C
干燥失重:≤0.2%
性状:灰粉末,室温下长期放置会缓慢分解。易吸潮,易分解
用途:生化研究。用于制备N-Fmoc基,用于固相多肽合成。 也用于毛细管电泳
保存:2~8℃
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)