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详细介绍
小鼠肺大动脉平滑肌原代细胞
小鼠肺大动脉平滑肌细胞分离自肺大动脉组织；肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺大动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一，在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺大动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺大动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发生发展的重要病理学特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键。研究表明，急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压，即缺氧性肺动脉高压，推断缺氧可能是通过促进肺大动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发生发展。肺大动脉平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞。肺大动脉平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。
英文名称 | Mouse Pulmonary Great Artery Smooth Muscle Cells | 组织来源 | 肺动脉组织 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7046 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：小鼠肺大动脉平滑肌细胞
组织来源：肺动脉组织
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
方法简介
公司实验室分离的小鼠肺大动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠肺大动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
胎牛血清FBS | 胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1抗体 |
PEST含核蛋白抗体 | 轴突蛋白5抗体 |
FMS样酪激酶3配体抗体 | 上皮酪激酶/乳腺癌激酶10抗体 |
紧密连接蛋白3抗体 | 双特异性酪酸化调节激酶3抗体 |
1号染色体开放阅读框192抗体 | 同源盒蛋白HOXC5抗体 |
PLXDC1 Others Human 人 PLXDC1 / TEM3 / TEM7 人细胞裂解液 (阳性对照) | Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮细胞生长培养基(即用型) 500ml |
人表皮角质细胞总RNAHEK NA | ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SW 1990(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 NCL-H460(非小细胞肺癌) | 5E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD73 / 5E 人细胞裂解液 (阳性对照) |
H22(小鼠肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠颗粒细胞MGC | CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CM-M122小鼠视网膜节细胞培养基100mL | 小鼠肺大动脉平滑肌原代细胞上皮酪激酶/乳腺癌激酶10抗体 |
NP Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | NRK-52E，大鼠肾细胞 |
人癌细胞;SK-BR-3 | hMNC-CB pooled Pellet 人类脐带血单核细胞混合团块，超 > 1 mio.cells 人角膜上皮细胞总RNAHCEpiC NA |
Calu-1人肺癌细胞 Calu-1 human lung cancer cells McCOY's 5A+10%FBS | 血小板内皮细胞黏附分子-1抗体 |
低密度脂蛋白受体相关蛋白5抗体 | ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
骨碱性酸酶抗体 | 纳曲酮抗体IgG |
GEM相互作用蛋白抗体 | PLXDC1 Others Human 人 PLXDC1 / TEM3 / TEM7 人细胞裂解液 (阳性对照) |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
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