详细介绍
小鼠鼻黏膜成纤维原代细胞
小鼠鼻黏膜成纤维细胞分离自鼻黏膜组织;黏膜是覆盖在机体内消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔内壁的一层组织结构,由上皮组织和疏松结缔组织构成。根据部位不同,有口腔黏膜、胃肠黏膜、鼻腔黏膜、气管黏膜、阴道黏膜、眼睑黏膜等不同名称。它们的结构也因功能、部位不一而不尽相同。鼻腔黏膜,简称鼻黏膜,覆盖于鼻腔表面,黏膜下方为软骨、骨或骨骼肌。成纤维细胞是结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
英文名称 | Mouse Nasal Mucosal Fibroblast Cells | 组织来源 | 鼻黏膜 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8492 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:小鼠鼻黏膜成纤维细胞
组织来源:鼻黏膜
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠鼻黏膜成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的小鼠鼻黏膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的小鼠鼻黏膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-1 | γ干扰素诱导蛋白202抗体 |
前列腺素F2a受体抗体PGF2αR | Centaurin α1抗体 |
FKBP135蛋白抗体 | 双微体2癌基因抗体 |
畸胎瘤衍化生长因子抗体(C端) | 特异性DMRT3蛋白抗体 |
1号染色体开放阅读框65抗体 | β氨基己糖苷酶A抗体 |
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) | Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium( 100ml |
人成纤维细胞裂解物HMFL | AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
METAP1 Others Human 人 METAP1 人细胞裂解液 (阳性对照) | BCAM Others Human 人 BCAM 人细胞裂解液 (阳性对照) |
LS-174T(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人细胞裂解液 (阳性对照) | BGN Others Mouse 小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CM-R020大鼠上皮细胞培养基100mL | 小鼠鼻黏膜成纤维原代细胞双微体2癌基因抗体 |
PRKD2 Others Human 人 PRKD2 / PKD2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | RSC, 大鼠雪旺细胞 |
人癌细胞;MDA-MB-231 | hMNC-PB single donor Pellet 人类外周血单核细胞团块单一捐献者,超 > 1 mio.cells 人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC NA |
F98大鼠脑胶质瘤细胞 F98 rat glioma cells DMEM+10%FBS | 6号染色体开放阅读框223抗体 |
Rho的核苷酸交换因子12抗体 | CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照) |
乳腺癌相关蛋白2抗体 | 高分子量丝蛋白抗体 |
糖基转移酶8结构域1抗体 | CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。