详细介绍
小鼠Ⅱ型肺泡上皮原代细胞
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。
英文名称 | Mouse Alveolar Type II Epithelium Cells | 组织来源 | 肺组织 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7006 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞
组织来源:肺组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介
公司实验室分离的小鼠Ⅱ型肺泡上皮采用弹灌注消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠Ⅱ型肺泡上皮经SP-C免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2 | 生长抑制因子基因1抗体 |
丝/苏蛋白激酶PCTK2抗体 | 猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白抗体 |
肽基异构酶酶FKBP8抗体 | 粒体融合蛋白1抗体 |
COG1蛋白抗体 | 抑癌蛋白DKK1抗体 |
1号染色体开放阅读框69抗体 | 转录因子HELT蛋白抗体 |
NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照) | IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) |
人导管癌细胞;HCC38 | LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照) |
A2780(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H115人脑动脉血管内皮细胞培养基100mL SV40T转化的人胚肾细胞(亚系);293T/17 | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人细胞裂解液 (阳性对照) | HAoAF Pellet 人主动脉外膜成纤维细胞团块 > 1 mio.cells 人表皮黑色素细胞-深色素裂解物HELM-d L |
CM-R023大鼠淋巴管内皮细胞培养基100mL | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮原代细胞粒体融合蛋白1抗体 |
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) | 犬肾细胞;MDCK(NBL-2) |
SW 1353(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | 水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3 细胞,Hela细胞 HEL299(红白细胞白血病细胞) |
CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人细胞裂解液 (阳性对照) | 整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体 |
微管相关蛋白轻链3C抗体 | 801-D (人巨细胞性肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11 |
乳腺癌扩增序列蛋白4抗体 | 低分子量丝蛋白抗体 |
胞浆区相关蛋白GIPC2抗体 | NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人细胞裂解液 (阳性对照) |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。