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详细介绍
兔胚胎成纤维原代细胞
兔胚胎成纤维细胞分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
英文名称 | Rabbit Embryonic Fibroblast Cells | 组织来源 | 胚胎 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7890 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称：兔胚胎成纤维细胞
组织来源：胚胎
产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔胚胎成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
方法简介
实验室分离的兔胚胎成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔胚胎成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
HFL1人胚肺成纤维细胞 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培养基+10%FBS | 酸化细胞分化周期CDC42蛋白抗体 |
酸化核基质结合区结合蛋白1抗体 | 转录中介因子Tif1γ抗体 |
肿瘤抑制基因LATS1抗体 | 酸化膀癌缺失基因1抗体 |
猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白抗体 | 酸化细胞分化周期CDC42蛋白抗体 |
酸化膀癌缺失基因1抗体 | 转录中介因子Tif1γ抗体 |
SCGB1A1 Protein Mouse 重组小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 标签) | 猕猴皮肤细胞;MMS7 |
LOVE1细胞，结直肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,B16细胞 EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-29 | HCC827(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0399NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 | CBRH-7919 大鼠肝癌细胞 |
MDA-MB-415 人腺癌细胞 | 人肝窦内皮细胞裂解物HHSECL |
人前列腺癌高转移细胞株;PC-3M IE8 大鼠骨细胞培养基 100mL | 兔胚胎成纤维原代细胞酸化膀癌缺失基因1抗体 |
心肌成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) |
PDGFC Others Human 人 PDGF-C / SCDGF 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H127人晶状体上皮细胞培养基100mL |
3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 | 酸化指状蛋白RET抗体 |
猪圆环病毒Ⅱ型衣壳蛋白抗体 | 人表皮角质形成细胞培养基 100mL |
酸化核基质结合区结合蛋白1抗体 | 肿瘤抑制基因LATS1抗体 |
酸化指状蛋白RET抗体 | SCGB1A1 Protein Mouse 重组小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 标签) |
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
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