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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔颞下颌关节软骨采用胶原酶联合蛋白酶消化制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔颞下颌关节软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔颞下颌关节软骨原代细胞 | 组织来源 | 软骨 |
英文名称 | Rabbit Temporomandibular Joint Chondrocyte Cells | 货号 | YS-01X8401 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔颞下颌关节软骨细胞分离自颞下颌关节软骨组织，颞下颌关节又称颞颌关节"或下颌关节"。由下颌头与颞骨下颌窝和关节结节组成，左右合成一联合关节，主理张口闭口和咀嚼运动。关节囊松弛，侧方为内、外侧韧带所加强。囊内的关节盘呈卵圆形，由纤维软骨组成，区分为前、中、后三部分。上面呈鞍状，前凹后凸，与关节结节和下颌窝的凸凹轮廓相对应；下面凹正对下颌头，周缘与关节囊相接，前缘与穿过关节囊的翼外肌腱相连。关节盘将关节腔分成上、下两半。关节外更有蝶下颌韧带(蝶棘至下颌小舌)和茎突下颌韧带(茎突至下颌角)予以加固。关节软骨属于透明软骨，表面光滑、呈淡蓝色、有光泽，它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架，这种框架呈半环形，类似拱形球门，其底端紧紧附着在下面的骨质上，上端朝向关节面，这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来，同时当受到压力时候，还可以有少许的变形，起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间，散在分布着软骨细胞，软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成，这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有支配，也没有血管，其营养成分必须从关节液中取得，而其代谢废物也必须排至关节液中，关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动，使关节软骨不断的受到压力刺激才行，所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与关节软骨表面平行，越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形、染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内，这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，关节软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，关节软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每3-4天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：梭形、多角形
传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔颞下颌关节软骨细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
小鼠海马趾元MN-h | 跨膜蛋白29抗体 |
谷草酰乙酸转氨酶1样蛋白1抗体 | 酰基A脱氢酶短链抗体 |
艾滋病病毒复制结合蛋白抗体 | FosB蛋白抗体 |
α2纤溶酶色素上皮衍生因子抗体 | 跨膜蛋白29抗体 |
FosB蛋白抗体 | 酰基A脱氢酶短链抗体 |
CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人淋巴细胞;1301 人肠动脉内皮细胞培养基 100mL |
人肝星形细胞HHSteC | CCL17 Others Human 人 CCL17 / TARC / SCYA17 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人细胞裂解液 (阳性对照) | REG1A Others Rat 大鼠 REG1A / PSPS 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CD200R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200R / OX2-R 人细胞裂解液 (阳性对照) | NCI-H838[H838]细胞，人肺癌细胞 人肺腺癌细胞,A2细胞 脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) |
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0903 | 兔颞下颌关节软骨原代细胞FosB蛋白抗体 |
SK-MEL-1细胞，人皮肤黑色素瘤细胞 德氏乳杆菌乳酸亚种 人十二脂肠腺癌;HuTu-80 | 人晶状体上皮细胞裂解物HLEpiCL |
CL-0117HT-1080(人纤维肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2 | ANGPTL7 Others Canine 狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HCM-c 人类心肌细胞 500,000cells 人肺动脉平滑肌细胞HPASMC | 卵巢滤泡激素抗体（BHD综合征） |
α2纤溶酶色素上皮衍生因子抗体 | AGS细胞，人胃腺癌细胞 人少突胶质前体细胞,HOPC-os细胞 恒河猴皮肤细胞;RM-S1 |
谷草酰乙酸转氨酶1样蛋白1抗体 | 艾滋病病毒复制结合蛋白抗体 |
卵巢滤泡激素抗体（BHD综合征） | CGA Others Human 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人细胞裂解液 (阳性对照) |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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